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毛滴虫是一种在鸽、鸡和鹰等鸟类中严重传播的寄生虫病,感染率高。鸽毛滴虫病严重影响成年鸽生产性能,甚至导致乳鸽死亡。生产中主要依赖药用植物提取物和化学合成药物进行预防和治疗,但存在用药成本高且药物残留等问题,需要通过抗病育种方法寻找新突破。目前大多研究都集中于鸽毛滴虫形态学、流行病学、诊断和治疗,关于鸽毛滴虫引起的病理损伤及不同耐受性个体差异表达基因的研究鲜有报道。本研究旨在通过攻毒试验利用RNA-seq筛选抗性基因,并探究外泌体蛋白质对鸽毛滴虫寄生的影响,为实现肉鸽的绿色养殖奠定基础。本研究通过调查不同品种鸽的毛滴虫感染率,确定了攻毒试验所用的鸽品种。进行鸽毛滴虫的原代培养及鉴定,成功制备了攻毒用的虫株。通过滴鼻方法攻毒,以口腔黏膜上的鸽毛滴虫数量区分易感组(S)和耐受组(T),探究这两组之间的病理变化差异,并使用RNA-seq技术筛选差异表达基因。使用超速离心法提取虫源外泌体,Label-free分析其蛋白质谱表达。结果显示:(1)公鸽的感染率显著高于母鸽(P<0.05),成年鸽感染率显著低于乳鸽(P<0.05),白羽王鸽感染率最高(P<0.05)。显微镜下虫株具有明显的鸽毛滴虫特征,与鸽毛滴虫ITS1/5.8S/ITS2基因的比对率为98%,可用于后续攻毒试验。(2)嗉囊和食管耐受组的细胞凋亡明显高于其他两组(P<0.05),而脾脏易感组的细胞凋亡高于其他两组(P<0.05)。嗉囊、食管和脾脏免疫相关因子的RT-PCR结果表明耐受组具有较高的IL-1β和较低的TGF-β。脾脏易感组的凋亡相关因子表达较高,肝脏仅在1 DPI时表现为易感组的凋亡相关因子表达高。(3)分别在C vs S比较组中鉴定到285个和890个差异表达的mRNA和lncRNA,C vs T比较组中鉴定到157个和828个差异表达的mRNA和lncRNA,S vs T比较组中鉴定到95个和771个差异表达的mRNA和lncRNA;FAAH、DDIT4基因和mTOR信号通路具有参与调控鸽毛滴虫抗性的潜力,DHODH、OTUD1基因和Notch信号通路在鸽毛滴虫感染宿主过程中可能发挥关键作用。(4)提取物在透射电子显微镜下具有茶托样结构;NTA结果显示粒径集中于125.1 nm;CD63和TSG101等外泌体标记蛋白的条带明显,表明提取物为外泌体。虫源外泌体蛋白质可能在寄生虫的能量代谢、信号转导及生物合成等过程中发挥重要作用。综上所述,相比于易感组,耐受组对鸽毛滴虫感染表现出较强的免疫反应,加速了对寄生虫清除。FAAH和DDIT4基因可能是鸽毛滴虫的抗性候选基因。鸽毛滴虫分泌外泌体的蛋白质在寄生虫的能量代谢、信号转导及生物合成反应等过程中发挥重要作用。