瑞香狼毒根部黄酮类化合物的提取、分离纯化及生物活性测定

来源 :曲阜师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanjian2009
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瑞香狼毒系瑞香科狼毒属植物,资源丰富,根可入药,研究表明其具有止痛杀虫、抗菌、抗病毒等多种功效。本文以瑞香狼毒根部为研究对象,采用正交法优化了超声波辅助提取瑞香狼毒黄酮类化合物的工艺;研究了瑞香狼毒根部黄酮粗提物及其各级萃取物的抗虫及杀菌效果;对瑞香狼毒根部黄酮粗提物的乙酸乙酯相,采用硅胶柱层析法进行分离纯化及结构鉴定,为瑞香狼毒的进一步广泛开发利用提供了理论依据。主要成果包括以下几个方面:1.对瑞香狼毒根部总黄酮提取工艺进行了优化。确定乙醇为最佳提取溶剂;采用冷浸加超声辅助提取法,在单因素实验基础上,进行正交试验,选择影响瑞香狼毒根部总黄酮超声提取的四个关键因素,即超声功率、超声时间、超声温度、乙醇浓度进行正交实验,得出最佳的提取工艺条件是:液固比30:1,乙醇浓度80%,超声功率250W,超声时间60min,超声温度55℃,提取一次。在此工艺条件下瑞香狼毒根中黄酮类化合物得率为12.41%。2.实验采用柱层析,从瑞香狼毒根部总提取物中洗脱分离出了4种不同极性的黄酮组分,研究了瑞香狼毒黄酮粗提物及其不同极性黄酮组分的抗虫性,通过对菜青虫和麦管蚜虫的杀虫试验结果,可以得到瑞香狼毒根部总黄酮提取物的乙酸乙酯相和氯仿相均具有很好的抗虫活性,48h后均达到95%以上,正丁醇相次之,石油醚相几乎无活性。3.采用杯碟法研究了瑞香狼毒4种组分分别对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、变形杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、绿脓杆菌7种细菌以及黑霉、绿木霉、青霉、根霉4种霉菌的抑菌活性。结果表明瑞香狼毒根部抑菌性活性大小为:乙酸乙酯相>氯仿相>石油醚相>正丁醇相。其中乙酸乙酯相对所有供试菌种均表现出一定的抑制作用,对金黄色葡萄球菌和蜡状芽孢杆菌的最小抑菌浓度均为6.3mg/mL,最小杀菌浓度均为12.5mg/mL。4.对瑞香狼毒乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱进行分离和纯化,得到5个组分,进行杀菌实验,确定F1-4、F1-5活性最强,合并F1-4和F1-5,进行半制备分离,最终得到3个组分,通过颜色反应证明此3个组分可能是黄酮或黄酮醇类物质。
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