中药在使用中往往以复方形式出现,药对是中药复方配伍中最小的单位,也是中医临床使用当中的常用形式,是经医药学家长期使用并被证明行之有效的基础上,总结而来的,药对虽然组成简单,却具备中药配伍的基本特征,可以产生协同增加疗效或减少毒副反应的作用。川芎和白芷是治疗偏头痛常用的药对。本研究运用血清药物化学分析和药代动力学等研究手段,对川芎-白芷药对的吸收和体内代谢进行研究,旨在探讨和阐明川芎-白芷药对主要效应成分的肠道吸收特征、体内药代动力学特点,为揭示川芎-白芷药对的药效物质基础和新制剂的开发奠定基础。1实验目的1.1建立高效液相（HPLC）测定川芎、白芷药材效应成分含量的方法。1.2大鼠在体肠灌流实验研究川芎、白芷药材效应成分的肠吸收特性。1.3建立大鼠血浆GC-MS定量分析方法,考察单味药材和药对配伍使用的药代动力学特征。2实验方法2.1制备川芎、白芷药材提取物,建立定量分析川芎中阿魏酸、藁本内酯和白芷中欧前胡素、异欧前胡素、花椒毒酚的高效液相色谱方法,并测定这五种成分在不同批次药材间的含量。2.2采用大鼠单向肠灌流模型与2.1项下建立的HPLC分析方法,测定灌流液中功效成分的含量变化,计算吸收速率参数（K_a）和有效渗透系数(P_eff),分析川芎和白芷药材功效成分在各肠段、不同质量浓度及存在蛋白抑制剂情况下的吸收变化。2.3采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）的检测方法,首先对两种药材提取物中挥发性成分进行定性和定量分析,然后建立大鼠血浆定量分析方法,于SD大鼠灌胃后10 min、30 min、1 h、1.5 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h眼眶后静脉丛采血,样品处理后,测定其血药浓度,考察单味药材和配伍使用情况下的药代动力学特点。3实验结果3.1建立了以甲醇-水为流动相,梯度洗脱的方式,同时定量分析川芎中阿魏酸、藁本内酯的HPLC方法。以乙腈-水为流动相,梯度洗脱的方式,同时定量分析白芷中花椒毒酚、欧前胡素和异欧前胡素的HPLC方法。经方法学验证,上述两种方法的专属性、线性关系良好,精密度、重复性和回收率符合要求。使用上述方法对两种药材各五个批次进行了含量测定,结果表明,川芎药材中藁本内酯不同批次间含量具有显著性差异,白芷中三种物质含量不同批次间均具有显著性差异。3.2灌流结果显示川芎中藁本内酯与阿魏酸在肠道内各部位均有吸收,藁本内酯吸收较阿魏酸好。藁本内酯十二指肠的K_a=3.58×10^-3 s^-1,其肠道不同部位吸收大小的顺序为:回肠>十二指肠≈空肠>结肠,其吸收参数随质量浓度的增加而逐渐降低。在含有丙磺舒和维拉帕米的情况下吸收参数显著性提高（P<0.05）,且丙磺舒组的吸收明显高于维拉帕米组。阿魏酸十二指肠的K_a=1.23×10^-3 s^-1,空肠、回肠的吸收与十二指肠相比无显著性差异,在结肠处吸收显著性降低K_a=0.78×10^-3 s^-1。高、中、低三组质量浓度下的吸收无显著性差异,但在极高剂量下显著性降低。提取物中阿魏酸的吸收明显高于单体（P<0.05）,含丙磺舒后阿魏酸吸收显著性增加（P<0.05）。白芷中欧前胡素十二指肠的K_a=1.34×10^-3 s^-1,吸收明显好于异欧前胡素和花椒毒酚（P<0.05）,三种物质在肠道的吸收均不具有特定的吸收部位。随着白芷药材质量浓度的增加,白芷中三种成分的吸收具有显著性差异（P<0.05）。三种成分在单体和提取物组下的吸收不具有显著性差异。白芷药材灌流液中加入维拉帕米后,欧前胡素和异欧前胡素的吸收没有显著性变化,但花椒毒酚K_a=0.75×10^-3 s^-1显著性升高（P<0.05）。白芷药材灌流液中加入丙磺舒后,三种成分的吸收无显著性差异。3.3利用GC-MS对川芎、白芷药材提取物分别进行了定性和定量分析,共鉴定出川芎提取物中45种成分,多为酯类、苯酞类化合物,其中Z藁本内酯含量最高占30.34%,正丁基苯酞相对含量为10.16%。共鉴定出白芷提取物中34种物质,大多为酯类与醇类。建立了GC-MS内标法同时测定大鼠血浆中川芎药材中的藁本内酯、正丁基苯酞和白芷药材中的欧前胡素、白当归素的定量分析方法。该方法专属性和线性关系良好,精密度和回收率也符合要求,基质也未对测定造成干扰。药材血浆药动学考察结果表明,川芎药材单用下藁本内酯C_max=13903.0 ng·mL^-1与合用下没有显著性差异,单用下的正丁基苯酞C_max=1928.8 ng·mL^-1与合用组相比没有显著性差异。白芷药材合用下欧前胡素的AUC、T_max、C_max均与单用相比显著性上升（P<0.05）。合用下的白当归素的MRT（平均驻留时间）上升至5.7 h,达峰时间T_max推后至3.0 h。与单用组相比,藁本内酯和白当归素合用下血药浓度-时间曲线二次上升的现象消失。