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目的：二十六碳烯酸(Docosahexaenoic acid, DHA)高度富集于视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelium, RPE)细胞,经脂氧合酶代谢可被转化为protectin DX(PDX)。本研究目的为确定DHA衍生物PDX是否对氧化应激状态下ARPE-19细胞产生保护作用及其机制,为脂类及其衍生物在年龄相关性黄斑变性防治研究方面提供实验室证据。方法：取生长良好的ARPE-19(第16-18代)细胞,以完全DMEM/F12培养基均匀接种于96孔板(2×104/0.1ml/孔)或六孔板(4×105/2.0ml/孔),每日于倒置显微镜下观察。当细胞生长至接近80%融合时,以无血清DMEM/F12培养基液饥饿细胞24小时。在2000M叔丁基过氧化氢(tert-butylhydroperoxide, t-BH)处理2h对细胞进行氧化应激诱导前,分别以0.05μM、0.5μM、1μM、5μM或10μM PDX预孵育ARPE-19细胞20 mmin。氧化应激诱导结束后,以无血清DMEM/F12培养基液清洗细胞3次,去除多余t-BH。然后以含1%FBS的DMEM/F12培养基液继续处理细胞,按实验不同检测时间点收集细胞或细胞上清样本。其中：1)以含1% FBS的DMEM/F12培养基液处理细胞2小时,收集六孔板中的细胞用于实时荧光定量PCR检测；2)以含1%FBS的DMEM/F12培养基液处理细胞4小时,收集六孔板中细胞用于细胞内ROS检测；3)以含1% FBS的DMEM/F12培养基液处理细胞24小时,收集六孔板中的细胞用于T-AOC和SOD检测及WB分析,或收集96孔板中的细胞上清用于ELISA检测。结果：200μMt-BH诱导ARPE-19细胞2h,细胞内dichlorofluorescein荧光强度较正常对照组显著增强。氧化应激诱导结束后24 h细胞上清VEGF-A蛋白浓度较相同时间点正常对照组VEGF-A浓度增加,差别有统计学意义(P<0.001)。5 pMPDX或10μM PDX预孵育ARPE-19细胞20分钟,可显著降低氧化应激诱导后RPE细胞内ROS生成量(P<0.01)。以1μM、5μM或10μMPDX预孵育20 mmin,再对ARPE-19细胞进行氧化应激诱导,细胞SOD活性分别是氧化应激模型组的1.28倍、1.37倍和1.48倍,差别有统计学意义(P<0.01,P<0.01和P<0.001)；细胞T-AOC分别是氧化应激模型组的1.40%、1.80%和2.07%,差别有统计学意义(P<0.01,P<0.001和P<0.001)。当PDX预孵育浓度≥0.05μM时,相同时间点培养基上清TNF-α蛋白浓度较氧化应激模型组显著降低,差别有统计学意义(P<0.01)。当PDX预孵育浓度≥1μ时,培养基上清VEGF-A蛋白浓度较氧化应激模型组显著降低,差别有统计学意义(P<0.01)。当PDX预孵育浓度为10μM时,氧化应激后细胞内PGC-1α蛋白表达较氧化应激模型组细胞PGC-1α蛋白表达显著增加,差别有统计学意义(P<0.001)。结论：1) 200μM叔丁基过氧化氢处理ARPE-19细胞2小时,细胞内ROS生成量明显增多,细胞分泌VEGF-A较正常状态下显著增加,细胞活力良好,表现出RPE细胞在经历慢性氧化应激时的典型特征,可作为体外培养的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤模型。2) Protectin DX可以显著降低叔丁基过氧化氢诱导的炎症及炎症相关细胞因子释放,并通过直接增加PGC-1α表达而增强细胞的抗氧化能力,进一步调节ROS水平,减轻视网膜色素上皮细胞氧化损伤。