基于患者外周血炎症介质的H7N9感染预后预测模型的建立及应用

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目的:首先明确H7N9感染患者和健康对照组的血浆细胞因子/趋化因子的表达差异,然后分析H7N9感染患者的血浆细胞因子/趋化因子的表达和病毒载量、C反应蛋白、降钙素原、APACHE II评分、氧合指数、CD4+T细胞数、CD8+T细胞数的关系,最后鉴定与病人预后相关的关键分子标记物,建立H7N9感染患者预后的预测模型,为临床诊断和治疗提供帮助。方法:采集5例健康对照、7例轻症H7N9感染患者、11例重症患者和6例死亡患者的血浆样本,利用抗体芯片检测80种细胞因子/趋化因子。检测完成后,首先将24例患者根据疾病发展过程的不同,分为入院时(F irst)、出院或者死亡时(Last)和疾病进程中(Other)的样本(由于轻症病人住院时间短,样本收集较少,只有First和Other的样本),然后将三个阶段H7N9感染患者的结果与健康对照组比较,得到具有统计学意义的细胞因子/趋化因子。接着收集临床上检测的与疾病相关的指标(C-反应蛋白,降钙素原,APACHE II评分,氧合指数,病毒载量,CD4+T细胞数和CD8+T细胞数),通过斯皮尔曼相关系数分析,得到与疾病预后相关的细胞因子/趋化因子。最后,先根据疾病预后的不同,建立可以预测死亡单因子预测模型;再根据最小冗余最大相关(m RMR)建立准确性更高的多因子预测模型。结果:(1)对5例健康对照和24例H7N9感染患者进行分阶段Wilcoxon秩和检验分析,发现First阶段血浆中的MCP-2、IL-8等34种细胞因子/趋化因子的升高是有统计学意义的;按照同样的方法分析发现,Other及L ast阶段各有34种、35种具有统计学意义的细胞因子/趋化因子。而在三个阶段中,IGFBP-3持续低于健康对照组。(2)和临床指标的关联性分析结果显示,血浆BLC、IP-10的水平和七个与疾病相关的指标均存在相关,其中,与CRP、PCT和APACHE II评分存在正相关,而与CD4+T细胞数、CD8+T细胞数,OI和Ct值存在负相关。另外,血浆IL-8水平与CRP、PCT和APACHE II评分存在正相关,而与CD4+T细胞数、CD8+T细胞数和OI存在负相关。血浆MCP-3水平与CRP、PCT和APACHE II存在正相关,而与CD4+T细胞数、CD8+T细胞数和Ct值存在负相关。此外,血浆CCL24、IGFBP-2、OPN、OPG、HGF和IL-10水平均与其中的五个指标存在相关。(3)基于血浆中的BLC、IGFBP-1、MIF、OPN、IGFBP-2、IP-10、HGF、MIP-3α、IL-8、SCF和OPG的单因子预测模型,预测死亡的准确性较高(AUC≥0.80),其中BLC、IGFBP-1、MIF和OPN的AUC值≥0.90。(4)基于血浆中的BLC、IL8、IGFBP1、MIF、GDNF和HGF的多因子模型可以预测死亡,准确率达到100%;基于血浆中的IL8、IGFBP2、Leptin、ENA78、IP10、TIMP2、THPO、IL10和HGF的多因子模型可以预测轻症,准确率达到80%;结论:(1)H7N9感染患者存在高细胞因子血症。(2)血浆中BLC、IP-10的表达水平与疾病严重程度相关。(3)基于血浆中的BLC、IGFBP-1、MIF、OPN、IGFBP-2、IP-10、HGF、MIP-3α、IL-8、SCF和OPG可以作为单因子预测H7N9感染患者死亡。(4)基于血浆中的BLC、IL8、IGFBP1、MIF、GDNF、HGF组成的多因子模型可以预测H7N9感染患者死亡,准确率达到100%。
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