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目的:探讨Maresin-1(MaR1)对支气管哮喘小鼠气道炎症的抑制作用,并了解其作用机制。方法:将30只雌性BALB/C小鼠,随机分为5组,分别为对照组(Con)、哮喘模型组(OVA)、低剂量MaR1组(OVA+LD-MaR1)、中剂量MaR1 组(OVA+MD-MaR1)和高剂量 MaR1 组(OVA+HD-MaR1)。致敏:对照组给予腹腔内注射生理盐水处理,而其余四组分别于第1d、第7d、第14d给予腹腔内注射混合液0.2ml,即OVA2μg/只、氢氧化铝粉末2mg/只。激发:第21d-28d,对照组每天给予生理盐水雾化吸入,其余四组则每天给予1%OVA雾化吸入。MaR1处理:第25d-28d,对照组和哮喘模型组给予生理盐水尾静脉注射,而MaR1各剂量组在雾化激发前20min,从尾静脉分别注射0.1ng、Ing或10ngMaR1。最后一次激发结束后24h,分别收集各组小鼠的血清、肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid,BALF)和肺组织。采用瑞式-姬姆萨染色方法对BALF中炎症细胞进行分类和计数,采用H&E和PAS染色法观察肺组织病理学改变,通过酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测 BALF中 IL-4、IL-5、IL-13 及血清中 OVA-specific-IgE 和总 IgE 的浓度。Western blotting方法测量肺组织内IκBα、p-P65、P65、ICAM-1及COX-2的蛋白质含量。采用实时荧光定量 PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测ICAM-1mRNA和COX-2mRNA在肺组织中的表达水平。结果:(1).与对照组比较,哮喘模型组小鼠气道上皮细胞受损,杯状细胞增生,支气管管壁及其周围有大量炎症细胞浸润,且管腔内有大量的黏液栓。同时小鼠气道及其周围的炎症分级评分和杯状细胞增生评分也均明显高于对照组(P<0.001);而经MaR1处理后,哮喘小鼠气道的炎症反应及黏液高分泌明显改善,以高剂量组改善最为明显,同时小鼠气道及其周围的炎症分级评分和杯状细胞增生评分也随之下降(P均<0.05),下降程度呈剂量依赖性。(2)与对照组相比,哮喘模型组小鼠BALF中细胞总数明显增加,巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数也明显增多(P<0.001);与哮喘模型组相比,各MaR1组小鼠BALF中总炎症细胞数、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞数明显减少(P均<0.05),且呈剂量依赖性减少。然而,MaR1对哮喘小鼠BALF中巨噬细胞和淋巴细胞数则无明显影响。(3)哮喘模型组小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13的水平较对照组明显增高(P<0.001);经MaR1处理后,哮喘小鼠BALF中的IL-4、IL-5、IL-13的水平呈剂量依赖的方式下降,各MaR1组与哮喘模型组比较,其差异均有统计学意义(P均<0.05)。(4)哮喘模型组血清中OVA-specific-IgE及总IgE水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);与哮喘模型组比较,LD-MaR1组显示OVA-specific-IgE及总IgE水平轻微下调,但没有统计学意义,而MD-MaR1和HD-MaR1两组血清中OVA-specific-IgE和总IgE的表达水平则均明显降低(P均<0.05)。(5)与对照组相比,哮喘模型组肺组织中p-P65、P65、ICAM-1、COX-2的蛋白表达水平明显升高,而IκBα蛋白的表达水平则明显下调,差异均有统计学意义(P均<0.01)。然而,给予MaR1的处理后,哮喘小鼠肺组织中p-P65、P65、ICAM-1、COX-2的蛋白表达水平呈剂量依赖的方式下调,同时IκBα的表达则呈剂量依赖性上调,各MaR1组与哮喘模型组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05)。(6)与对照组比较,哮喘模型组肺组织中ICAM-1和COX-2的mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与哮喘模型组比较,各MaR1组小鼠肺组织中ICAM-1和COX-2的mRNA表达呈剂量依赖性降低,各MaR1组与哮喘模型组比较,其差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:(1).MaR1呈剂量依赖性减轻哮喘小鼠气道炎症及黏液高分泌。(2).MaR1可以降低哮喘小鼠血清OVA-specific-IgE和总IgE的表达水平,并呈剂量依赖性降低其BALF中IL-4、IL-5、IL-13的含量,提示MaR1能减轻哮喘小鼠Th2型免疫应答反应。(3).MaR1呈剂量依赖性上调哮喘小鼠肺组织中NF-κB抑制因子IκBα蛋白的表达,下调其肺组织中NF-κB的主要成员P65的表达,以及下调具有增强P65转录激活能力的p-P65的表达,提示MaR1能抑制哮喘小鼠NF-κB信号通路的活化。(4).MaR1呈剂量依赖性降低哮喘小鼠肺组织中ICAM-1、COX-2的mRNA和蛋白表达,提示MaR1可以下调哮喘小鼠NF-κB信号通路下游炎症因子如COX-2、ICAM-1等的表达。总之,MaR1可通过抑制哮喘小鼠Th2型免疫应答反应,并抑制其NF-κB信号通路的活化,进一步调控下游炎症因子如COX-2、ICAM-1等的产生,从而有效地减轻哮喘小鼠气道的免疫炎症反应,达到控制哮喘的作用。