清开灵注射液（QKL）是一种现代纯中药复方注射剂，源自我国传统良方“安宫牛黄丸”，广泛应用于清热解毒、热病神昏、抗病毒、抗肝炎和心血管病等多个治疗领域。但是由于中药注射剂（TCMI）化学成分复杂，且人体过敏反应原因尚未完全阐明，因此TCMI的过敏问题一直是中药现代化发展的瓶颈。本研究试图建立针对QKL致敏物质的快速、灵敏的检验方法，将植物活性追踪法与细胞致敏实验有机结合起来，在明确其致敏成分基础上进一步建立去除杂质的方法，从而为TCMI的发展提供重要的理论基础。主要研究内容与结果如下：1、使用超滤膜对QKL水牛角和珍珠母水解液注射液进行了组分分离，并使用HPLC、MS和NMR分析了QKL中的引起RBL-2H3细胞发生脱颗粒的三种组分注射液，结合组分致敏性评价，得到可疑致敏物质的相关信息。研究发现水牛角和珍珠母水解液注射液中分子量3000以上的蛋白具有致敏效应；猪去氧胆酸注射液中残留的胆酸为可疑致敏物质；栀子注射液中引起细胞致敏效应的差异峰经LC-MS分析，得到差异峰的分子量，为对差异峰的鉴定提供了数据支持。2、利用植物活性成分追踪法与细胞致敏实验有机结合，首先使用有机溶剂对栀子提取液进行萃取分离操作，将具有致敏活性的组分富集到氯仿层中；再经过薄层层析色谱条件探索，使用硅胶柱层析方法对氯仿层的成分进行进一步分离，得到28个部分，并通过细胞致敏实验对成分的致敏性评价，将过敏成分锚定在其中的7号到13号组分中。3、利用植物活性成分追踪法与细胞致敏实验有机结合，首先使用有机溶剂对栀子提取液进行萃取分离操作，将具有致敏活性的组分富集到水相中；再经中压制备色谱和高效制备色谱进行多级分离，通过检测细胞致敏实验中的细胞内的组胺、β-己糖苷酶和钙离子的荧光强度变化情况为指标，分离得到了两个能够引起肥大细胞发生脱颗粒效应的致敏组分。经纯度分析和结构判定，确定这两个成分主要由京尼平苷和蔗糖组成，但其中仍有微量的杂质。正是这微量的杂质，具有致敏活性，诱导细胞产生类过敏反应。4、通过筛选树脂类型，研究了树脂吸附率及解吸率，洗脱流速，洗脱剂浓度还有洗脱体积等因素，优化后得到了大孔树脂纯化京尼平苷的工艺参数：选用D301R树脂，20%乙醇，流速为1.43BV/h，洗脱体积为3个BV，粗品再经有机溶剂萃取。经HPLC检测，树脂分离后的京尼平苷纯度达到87%，经正丁醇萃取后的京尼平苷纯度可达到97%以上。