【摘 要】
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牛病毒性腹泻/粘膜病(Bovine viral diarrhea/mucosal disease, BVD/MD),由牛腹泻/粘膜病毒引起的,是黄病毒科、瘟病毒属的成员之一,在牛的病原学上具有很重要的地位。目前为
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牛病毒性腹泻/粘膜病(Bovine viral diarrhea/mucosal disease, BVD/MD),由牛腹泻/粘膜病毒引起的,是黄病毒科、瘟病毒属的成员之一,在牛的病原学上具有很重要的地位。目前为止,还没有有效的预防和控制BVDV的措施。因此,建立高效快速的检测方法,对于该病的早发现,早防治具有重要作用。本文根据BVDV5’-UTR区的高保守性的特点,通过引物、探针设计和反应条件的优化,分别建立了检测BVDV的通用型RT-PCR方法、通用型荧光定量RT-PCR方法、同时检测BVDV I型和Ⅱ型病毒的双重荧光定量RT-PCR方法。其次,通过引物设计和搭桥法PCR扩增,获得BVDV内标荧光PCR扩增模板,并构建了含内标物的BVDV通用型荧光定量RT-PCR方法。上述方法具有较好的特异性、灵敏度与可重复性,内标物的构建还可对反应过程进行监测,确保检测结果的准确性。上述方法的建立,达到对该病快速、灵敏、准确检测的目的。
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