论文部分内容阅读
目的：1、探讨不同进程PD大鼠血清MLT的变化，与脑微透析液中MLT比较。2、探讨不同进程PD大鼠血清MLT与APO诱导的旋转圈数以及黒质TH免疫阳性细胞间的关系。3、检测临床PD病人的血清MLT水平，探讨血清MLT水平与PD病人临床症状分级间的关系。4、明确MLT与PD的关系，为临床治疗PD提供新的思路。方法：1、采用脑内单侧双点注射6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）至大鼠右侧黑质致密部（substantia nigra pars compacta, SNc）和右侧前脑内侧束（medialforebrain bundle, MFB）建立偏侧帕金森病（Parkinson’s disease, PD）模型。分别于建模后2W、4W、6W、9W上午10:00收集PD大鼠尾静脉全血，离心取血清，酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清MLT水平，并与脑透析结果进行比较。2、采用大鼠黑质TH免疫组织化学染色方法，了解中脑黑质DA能神经元的变化及与MLT水平的关系。3、上午8:00-10:00收集临床PD病人全血，采用ELISA检测血清中MLT水平，并根据目前国际公认的Hoehn and Yahr scale分级标准，对PD患者进行分级，了解MLT与PD患者年龄、性别及病程间的关系。结果：1、 PD组大鼠建模后2W、4W、6W、9W APO诱导的旋转圈数分别为（191.40±12.98）turn/20min、（271.60±26.51）turn/20min、（306.40±38.96）turn/20min和（336.60±16.04）turn/20min，均明显高于生理盐水组（P<0.001）和正常对照组（P<0.001）。2、上午8:00-10:00PD组大鼠2W、4W、6W、9W血清MLT水平逐渐升高，而生理盐水组和正常对照组2W、4W、6W、9W血清MLT水平没有明显的变化。2W、4W、6W、9W PD组大鼠血清MLT水平均高于生理盐水组和正常组，P值分别是P<0.05、P<0.01、P<0.01和P<0.001。PD组大鼠血清MLT相对正常组和生理盐水组每2W-3W升高了1.97-14.43%。3、 PD组大鼠毁损侧（右）黑质TH免疫阳性细胞数明显低于健侧（左），且随着周数的增加减少更明显。PD组大鼠2W、4W、6W、9W毁损侧TH免疫阳性细胞与健侧相比分别减少了75.22%2.12%，81.22%1.32%，87.41%1.04%，93.1%0.54%，差别均有统计学意义（2W、4W、6W P<0.001；9W P<0.001，n=5)。生理盐水组与正常组的左右两侧黑质TH免疫阳性细胞数差别无统计学意义。4、 PD组大鼠2W、4W、6W、9W血清MLT与旋转圈数呈正相关性，R=0.608，P<0.01(n=20)；PD组大鼠2W、4W、6W、9W毁损侧（右）TH阳性细胞数与血清MLT水平呈显著的负相关性，|r|=0.84，P<0.01(n=20)。5、临床PD病人血清MLT水平为（90.69±5.89pg/ml，n=56），明显高于对照组（49.65±1.97pg/ml，n=43），PD病人相对对照组增加了44.85%8.45%，P<0.01；临床男性PD病人血清MLT水平为（87.31±5.59pg/ml，n=44），明显高于对照组男性（52.63±3.27pg/ml，n=23)，PD组病人相对对照组增加了39.25%7.65%，P<0.01；临床女性PD病人血清MLT水平为（103.07±18.52pg/ml，n=12)，明显高于对照组女性（46.22±1.72pg/ml，n=20)，PD组病人相对对照组增加了53.35%10.05%，P<0.01。6、参照国际Hoehn and Yahr症状分级标准，临床PD病人症状分级与血清MLT水平呈高度相关性，r=0.6，P<0.01（n=56）。7、健康对照组血清MLT水平随着年龄的增加呈降低趋势。健康对照组年龄≤35岁组血清MLT水平为（53.800.71）pg/ml， n=20；年龄≤55岁组血清MLT水平为（52.511.02）pg/ml，n=16；年龄≤85岁组血清MLT水平为（49.651.97）pg/ml, n=43，差别无统计学意义。结论：1、6-OHDA诱导的偏侧PD模型大鼠血清MLT水平随时间增加逐渐增高，可能与PD的进展有关。2、临床PD病人血清MLT水平的升高可能与PD的病程进展有关。3、血清MLT水平可能是临床判断PD病严重程度的一个潜在指标？