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目的:本实验用19%(v/v)的DMSO灌注兔离断后肢,用4种不同冷冻复温方法,对复合组织中的骨骼肌组织损伤程度进行对比研究,找到损伤程度最轻的冷冻复温方法。方法:25只健康的新西兰大白兔随机分为对照组(A组)及实验组(B、C、D、E组,B组为慢冻快复组,C组为慢冻慢复组,D组为快冻慢复组,E组为快冻快复组),实验所用后肢均在髋关节处离断。对照组(A组)后肢在离断后直接用于制作标本。实验组(B、C、D、E组)先用19%浓度DMSO(二甲基亚砜)灌注,肝素盐水洗脱。然后B组慢速冷冻—快速复温、C组慢速冷冻—慢速复温、D组快速冷冻--慢速复温、E组快速冷冻—快速复温,然后采取与对照组相同方法制作标本,病理切片用HE染色后观察骨骼肌损伤程度。根据病理染色的结果,对骨骼肌组织的损伤程度进行统计学分析。结果:经苏木精-伊红(HE)染色后的骨骼肌病理切片为:对照组(A组):骨骼肌细胞核及细胞形态正常,骨骼肌组织未见肌纤维破坏及空泡形成;实验B组:肌细胞肿胀,可见肌纤维断裂,组织形态尚正常;实验C组:肌细胞水肿较轻,有少量空泡,部分肌纤维断裂;实验D组:肌细胞水肿严重,少量空泡,部分肌纤维断裂;实验E组:肌细胞肿胀明显,大量空泡化,肌纤维断裂明显,肌纤维部分溶解。结论:1.在19%(v/v)二甲基亚砜灌注条件下,实验组(B、C、D、E组)和对照组(A组)病理切片结果之间存在显著性差异,这表明深低温冷冻复温对细胞有损伤;2.各个实验组之间的结果差异有统计学意义,说明骨骼肌损伤程度因冷冻复温方式不同而不同;3.实验组骨骼肌损伤程度由轻到重为:慢速冷冻-快速复温组<慢速冷冻-慢速复温组<快速冷冻-慢速复温组<快速冷冻-快速复温组,可以认为在四种冷冻复温方法中,慢速冷冻-快速复温是最佳的冷冻复温方法。