脂肪源干细胞对造血干细胞移植后归巢及体内分布的研究

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目的:针对脂肪肪源间充质干细胞对移植后造血干细胞的归巢作用及对组织修复支持的初步探索。方法:严格无菌条件下获取C57BL/6雄性小鼠脂肪源间充质干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)、骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal stem cell,BMSCs)及小鼠胚胎制备成纤维细胞,培养至第三代后观察细胞形态。行ADSCs的成脂及成骨诱导分化,油红O及茜素红染色鉴定ADSCs的多方向分化潜能。应用细胞荧光标记物DID~+标记LSK细胞、CSFE~+标记ADSCs及RF细胞。使用清髓性预处理受鼠BABL/C进行设计实验分组:(1)空白对照;(2)1500个DID~+LSK细胞;(3)1500个DID~+LSK细胞、1x10~6个CFSE~+RF;(4)1500个DID~+LSK细胞、1x10~6个CFSE~+ADSCs。经小鼠尾静脉分组输注,24小时后处死小鼠留取股骨、肝、脾、肺、肠、心、肾行蜡块包埋,制作蜡块病理切片并行HE染色。免疫荧光检测各器官中的DID~+、CSFE~+的分布。结果:C57BL/6脂肪组织获取细胞为间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)细胞,具有多方向分化功能。ADSCs+LSK共输注的BABL/C小鼠病理切片可发现ADSCs可促进LSK细胞的归巢及造血恢复。经荧光标记的DID~+LSK细胞、CSFE~+ADSC、CSFE~+RF经小鼠尾静脉输注后在股骨中的分布较多,其余器官未见明显浓聚。结论:ADSCs促进LSK在体内的归巢作用较明显。目前考虑可能与ADSCs的免疫调节、组织修复、内分泌及旁分泌作用有关。经处死小鼠的HE病理切片及细胞荧光分布分析可得知ADSCs及LSK较多分布于股骨。
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