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知母是百合科知母属植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)的干燥根茎,广泛分布于我国黄河以北地区。知母味苦甘,性寒,入肺、胃、肾经,是我国的一种传统中药,具有清热除烦、泻肺滋肾的功效,主要治疗烦热消渴、热性病高烧、肺热咳嗽、结核病发热、糖尿病、大便干燥等症。近年,知母与其它中草药配伍,在临床上用于病毒性疾病的治疗,但对其抗病毒活性成分的研究尚未见报道。本论文以抗病毒活性为导向,对知母中抗病毒活性部位中化学成分进行了较系统地研究。
本研究选择细胞病变法(cytopathic effect,CPE)以抗呼吸道病毒(流感病毒、单纯疱疹病毒)为指标,采用活性追踪的方法,对知母水提物进行了抗病毒活性筛选,发现其乙酸乙酯部位具有显著的抗病毒活性;并采用现代提取、分离、纯化技术(制备薄层、反相C-18硅胶柱、反相C-8硅胶柱、凝胶柱层析、高效液相色谱等),从乙酸乙酯活性部位中共分离得到16个单体化合物(1-16);利用理化性质和光谱学方法(UV、MS、IR、1D-NMR及2D-NMR),对所有16个化合物的化学结构进行了阐明。化合物的结构分别是:知母双环烯酮(1)、金色酰胺醇酯(2)、金色酰胺醇(3)、香豆酰基酪胺(4)、N-反式阿魏酰基酪胺(5)、N-顺式阿魏酰基酪胺(6)、环(酪-亮)二肽(7)、烟酸(8)、顺.扁柏树脂酚(9)、甲基-顺-扁柏树脂酚(10)、芒果苷(11)、2,6,10,10-四甲基-1-氧杂-螺环[4.5]-3,6-二烯-8-酮(12)、对羟基亚苄基丙酮(13)、2-羟苯基-2-丁烯酸(14)、对羟基苯甲酸(15)、香草酸(16)。上述化合物中,化合物(1)为新化合物,化合物(2~8)为首次在知母中发现,化合物(2~7)是首次从百合科植物中分离得到;另外,除化合物9、10、11外,其它化合物均为首次从该植物中分离得到。
本论文从知母的抗病毒活性部位乙酸乙酯提取物中共分离得到16个化合物,其中一个为新化合物。化合物的结构类型包括,7个生物碱类化合物, 2个木脂素类化合物,2个烯酮类化合物,1个口山酮类化合物和4个酚类化合物,这些单体化合物的抗病毒活性评价正在进行中。上述研究为进一步阐明知母的抗病毒活性成分奠定了基础。