HPLC法测定黑莓果汁中鞣花酸和维生素C的方法研究

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黑莓是原产于欧洲的悬钩子属多年生藤本植物,其果实风味独特,营养丰富。其中抗癌物质鞣酸、抗氧化物质超氧化物歧化酶含量均高于其他水果,被称为第三代“水果之王”。黑莓中含有大量花青素及多酚类物质,因此其具有较强的保健及药用价值,能够清除体内自由基、调节机体代谢机能、消除疲劳、延缓衰老、提高免疫力。黑莓含有丰富的膳食纤维,不含胆固醇,对于保持消化系统健康、增强免疫系统、降低血液中胆固醇总量、防治心脑血管疾病及降低化疗毒副作用具有一定的保健及治疗功效。黑莓果汁是黑莓的深加工产品,在加工过程中,根据工艺需求有时会添加其它物质以改良口感,延长保存时间。实际产品的加工、运输、储藏过程均可能使果汁中所含的各类活性物质如鞣花酸、花青素、各类维生素与矿物质、超氧化物歧化酶等的含量产生变化。黑莓果汁中保健成分的组成及含量研究对于相关企业生产工艺改进、产品质量控制及消费者日常保健、权益保障具有较强的指导借鉴意义。本文建立了黑莓果汁中鞣花酸和维生素C保健成分的分析测定方法,并将其应用于市售果汁产品品质检测中,主要内容如下:1.建立黑莓果汁中鞣花酸含量的HPLC测定方法。实验条件为:Lichrospher C18柱(150 mm x 4.6 mm,5μm)色谱柱、柱温35℃;流动相为5mmol/L醋酸铵缓冲液(pH3.0):甲醇=55:45;检测波长为254nm;采用外标法测定鞣花酸含量。实验结果表明,鞣花酸含量5-30μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9995。该方法灵敏、稳定、可靠。将其用于实际,测得黑莓果汁产品中鞣花酸为14.12μg/mL,明显低于黑莓水果,表明实际加工工艺可能需要进行改进。2.建立了简便快速的黑莓果汁中总维生素C的HPLC测定方法。样品中脱氢型抗坏血酸经二硫苏糖醇(dithiothreitol, DTT)还原成抗坏血酸后,采用正向高效液相色谱法,使用氨基柱分离使维生素C与其他强极性的化合物得到良好分离并可定量测定,消除了果汁中其他组分对于测定的干扰。方法准确、简便、快速,适于黑莓果汁中总维生素C的含量测定。本文建立了黑莓果汁中保健成分鞣花酸和维生素C的HPLC测定方法,为黑莓果汁中保健成分的组成及含量研究、相关企业生产工艺改进、产品质量控制等提供了参考。
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