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目的 了解上海地区社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)的发病和病原学分布情况,明确上海地区CAP常见致病菌的耐药情况,了解非典型病原体如肺炎支原体、肺炎衣原体在CAP致病原中所占的比例,为本地区CAP的经验治疗提供依据。 方法 收集上海地区四所医院符合研究条件的成人CAP新发病例,入选病例必须符合中华医学会呼吸病学分会1998年制定的《社区获得性肺炎诊断和治疗指南(草案)》的诊断标准,包括年龄≥18岁;胸部X线检查必须有新出现的浸润阴影或实变;同时必须有下列症状体征中的至少3项:①咳嗽或咳嗽加重;②痰性状的突然改变;③体温(口腔)>38℃或<36.1℃或在近24小时内有明确的发热或体温过低;④肺部听诊有啰音,或其他肺实变的证据;⑤外周血象白细胞(血白细胞计数>10×109/L或杆状核细胞>0.15⑥全身不适、肌肉酸痛或胃肠道症状。 1.细菌学检测 采集患者合格呼吸道分泌物标本(痰、咽拭子或鼻咽部吸取物)及时接种于血平板、巧克力平板和麦康凯平板,35℃培养16~24h,应用常规方法进行细菌分离鉴定,应用K-B法对分离培养出的细菌测定体外药敏活性,应用稀释法测定MIC值。 2.非典型病原体检测 ①采集患者合格呼吸道分泌物标本(痰、咽拭子或鼻咽部吸取物),制备DNA模板,扩增针对肺炎支原体敏感性较强的P1粘附蛋白基因,检测阳性者再进行具有种属特异性的16S rRNA基因的扩增,进一步验证PCR扩增的阳性结果。相类似的,将采集的呼吸道分泌物标本进行肺炎衣原体16S rRNA基因的PCR检测,检测阳性者再扩增特异性53kDa免疫显性蛋白的保守区,验证结果的可靠性。②采用酶联免疫测定法(EIA)进行尿标本的嗜肺军团菌尿抗原测定。③采集患者急性期和恢复期(2~4周后)的双份血清标本,采用颗粒凝集法(PA)检测双份血清肺炎支原体抗体;采用微量免疫荧光法(MIF)检测双份血清肺炎衣原体IgM抗体;采用间接荧光免疫法(IFA)检测双份血清抗嗜肺军团菌抗体IgG。 结果 从2002年9月至2004年12月,共收集合格的CAP病例247例,共有128例患者病原学检测阳性,其中混合感染20例(15.6%),病原学阳性数为