HMGB1/TLR4和NF-κB信号通路在子痫前期中的研究

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目的:1.探讨高迁移率族蛋白(HMGB1)/TOLL受体4(TLR4)和NF-κB信号通路在子痫前期中的可能作用;2.研究子痫前期患者血清和胎盘中HMGB1、TLR4及NF-κBp65的表达及其相关性,从而探讨其与子痫前期的关系。方法:选择轻度子痫前期患者10例、重度子痫前期患者20例和同期正常妊娠组30例作为研究对象。1.二步法免疫组织化学(SP法)检测胎盘HMGB1、TLR4、NF-κBp65蛋白的表达变化及在组织中的定性、定位;2.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胎盘组织中HMGB1mRNA、TLR4mRNA、NF-Bp65mRNA的表达变化;3.采用ELISA方法检测血清中HMGB1、TLR4、NF-κBp65蛋白浓度。结果:1.选取的病例在临床特征比较中,子痫前期组与对照组在年龄比较差异无统计学意义(P>0.05);重度子痫前期组比对照组孕妇终止妊娠时间早(P<O.05),轻度子痫前期组与对照组在终止妊娠时间比较差异无统计学意义(P>0.05);子痫前期组平均动脉压(MAP)、收缩压、舒张压、新生儿体重与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2.免疫组化结果显示:2.1正常妊娠组HMGB1主要表达于胎盘组织滋养细胞、血管内皮细胞、少量间质细胞的胞核,HMGB1在轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘组织滋养细胞、血管内皮细胞、少量间质细胞的胞核及胞浆表达;TLR4、NF-κBp65蛋白均主要表达于胎盘组织滋养细胞、血管内皮细胞、少量间质细胞的胞浆及胞膜。2.2子痫前期患者组胎盘HMGB1、TLR4、NF-κBp65蛋白表达均较正常对照组明显增强,差异有显著性(P<0.0125);重度子痫前期患者胎盘HMGB1、TLR4、NF-Bp65蛋白与轻度子痫前期比较差异无条统计学意义(P>O.0125)。3.RT-PCR结果显示:3.1子痫前期患者胎盘组织中HMGB1mRNA、TLR4mRNA、NF-Bp65mRNA表达均明显强于正常组,差异有显著性(P<0.05);重度子痫前期患者胎盘HMGB1、TLR4、NF-Bp65mRNA与轻度子痫前期比较差异无统计学意义(P>O.05)。3.2HMGB1mRNA与TLR4mRNA的表达强度呈正相关,相关系数(r=0.567,P0.01);HMGB1mRNA与NF-Bp65mRNA的表达强度呈正相关,相关系数(r=0.683,P0.01);TLR4mRNA与NF-Bp65mRNA的表达强度呈正相关,相关系数(r=0.729,P0.01)。4.ELISA测定结果显示:4.1子痫前期患者血清中HMGB1、TLR4、NF-κBp65的含量较正常组明显升高,差异有显著性(P0.01);且重度子痫前期患者血清中HMGB1、TLR4、NF-κBp65蛋白表达高于轻度子痫前期(P<O.05)。4.2血清NF-κBp65与TLR4的表达强度呈正相关,相关系数(r=0.549,P0.01);血清HMGB1与TLR4的表达强度呈正相关,相关系数(r=0.668,P0.01);HMGB1与NF-κBp65的表达强度呈正相关,相关系数(r=0.655,P0.01)。结论:当TLR4识别了作为炎症因子和内源性损伤相关分子模式配体HMGB1时,其下游信号通路开启,MyD88聚集,活化NF-κB并转录入核,释放大量炎性因子造成胎盘血管损伤,促进子痫前期的发生、发展,在子痫前期发病及围产儿预后中起着十分重要的作用。
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