阿拉善双峰驼骨骼肌纤维类型分析与卫星细胞体外培养

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gauxten01
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阿拉善双峰驼分为戈壁驼和沙漠驼,戈壁驼长期生活在广袤的戈壁滩,沙漠驼长期生活在沙漠腹地。戈壁驼的产肉性能比沙漠驼有着明显的优势,但原因还未清楚。本研究中采用了不同年龄(6岁、8岁、10岁)的戈壁驼和沙漠驼,对其进行宰性能比较、利用ATP酶染色法对不同部位骨骼肌(臂三头肌、背最长肌、股二头肌)的MyHC进行染色,测定不同类型MyHC百分含量,分析组织学性状;采用两步酶消化法和组织块法对沙漠驼骨骼肌卫星细胞进行体外培养,用差速贴壁法对其进行了纯化,采用胰蛋白酶浓度梯度法确定了卫星细胞最佳消化时间;特异性蛋白Pax7和Myo D1进行了免疫荧光染色鉴定。实验结果如下:戈壁驼活重比沙漠驼重约60 kg,胴体重比沙漠驼重约80 kg,净肉重比沙漠驼重约90kg,不同年龄之间和存在差异显著(P<0.05;P<0.01)。MyHC的含量上,6岁时,臂三头肌中戈壁驼骨骼肌MyHCⅠ和MyHCⅡb含量少于沙漠驼;MyHCⅡa含量高(P<0.05);8岁时,戈壁驼MyHCⅠ含量少于沙漠驼,但MyHCⅡa和MyHCⅡb高于沙漠驼(P<0.05);10岁时,戈壁驼中MyHCⅠ和MyHCⅡb含量高,MyHCⅡa含量低于沙漠驼(P<0.01)。在背最长肌中,6岁时,MyHC的含量相同于臂三头肌;8岁时MyHC的含量相反于臂三头肌;10岁时,戈壁驼中MyHCⅠ高于沙漠驼,但MyHCⅡa和MyHCⅡb含量低于沙漠驼(P<0.01),变化规律8岁相同。在股二头肌中,6岁时,戈壁驼MyHCⅠ和MyHCⅡa含量高于沙漠驼,MyHCⅡb相反(P<0.05);8岁时,戈壁驼MyHCⅠ和MyHCⅡb含量低于沙漠驼,MyHCⅡa相反(P<0.05);10岁时,戈壁驼MyHCⅠ含量高于沙漠驼,但MyHCⅡa和MyHCⅡb相反(P<0.01)。在臂三头肌和背最长肌中,戈壁驼肌纤维直径普遍大于沙漠驼(P<0.05);背最长肌中的肌纤维直径普遍大于臂三头肌和股二头肌;戈壁驼三种肌纤维密度普遍大于沙漠驼(P<0.05),其中MyHCⅡa型的密度最大;在不同年龄段,6岁时的戈壁驼与沙漠驼三种肌纤维直径差异最大,10岁时的直径差异最小(P<0.05);6岁时三种肌纤维密度普遍大于8岁和10岁。通过比较发现,两步酶消化法相比组织块法分离培养的卫星细胞形态良好,折光性强,纯度达到90%以上,培养时间短,更适用于卫星细胞的体外培养;通过胰蛋白酶浓度梯度实验得出卫星细胞最佳消化时间为8min—12min;特异性蛋白(Myo D1,Pax7)免疫荧光染色呈阳性表达。本文从组织学角度探索戈壁驼与沙漠驼屠宰性能差异的机制,为改良阿拉善双峰驼肉品质奠定基础。
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