目的:探讨雷帕霉素体外对急性单核细胞白血病SHI-1细胞体外增殖、凋亡的作用以及裸鼠皮下肿瘤的治疗作用。方法:1、以人来源的急性单核细胞白血病细胞株为研究对象,实验分组为阴性对照组及雷帕霉素组(终浓度分别为:5uM,10uM,20uM)。CCK8法检测不同浓度雷帕霉素在不同时间对SHI-1增殖的作用。用不同浓度的雷帕霉素处理SHI-1细胞,24小时后,Annexin/PI双染法检测细胞凋亡。5uM雷帕霉素处理SHI-1细胞24小时,检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3以及CAV1蛋白表达变化。2、以裸鼠为实验动物,将5×10~6个SHI-1细胞接种于裸鼠皮下,皮下成瘤后随机分为两组,每组6只,第一组为对照组,第二组为治疗组,皮下成瘤后第10天开始瘤体内注射雷帕霉素(10mg/kg),连续5天,于治疗后第1、5及10天测量肿瘤大小。结果:1、CCK8检测结果显示24h时5uM,10uM,20uM的雷帕霉素对SHI-1细胞增殖抑制率分别为:24.62±2.20%,49.63±2.96%,66.02±1.68%;48h时增殖抑制率分别为:43.5±3.51,%,65.1±2.42%,73.53±3.12%;72h时增殖抑制率分别为:72.8±2.61%,83.56±0.65%,92.06±2.15%。雷帕霉素对SHI-1有明显的增殖抑制作用,随着浓度增加及时间延长增殖抑制率增加,呈剂量与时间依赖。2、流式细胞仪检测显示24h时0uM,5uM,10uM,20uM的雷帕霉素处理SHI-1细胞后凋亡率分别为:2.39±0.63%,13.68±1.29%,23.61±1.61%,33.81±1.34%。与阴性对照组相比,5uM的雷帕霉素处理SHI-1细胞24小时即能诱导细胞凋亡,当浓度增加到10uM时,可明显诱导细胞凋亡,20uM雷帕霉素处理组凋亡比例明显升高。3、Western blot检测显示5uM雷帕霉素处理SHI-1细胞24小时后,凋亡相关蛋白caspase-3、Bax表达上升,Bcl-2表达下降,CAV1表达上升。4、将SHI-1细胞接种于祼鼠皮下第2天时,皮下悬液完全吸收,第5天肉眼可见皮下瘤体形成。治疗结束后第一天、第五天及第十天测量两组皮下肿瘤平均体积分别为:483.52±198.58mm~3、915.90±343.56mm~3、1371.75±406.72 mm~3(对照组),273.08±114.111mm~3、583.49±188.90mm~3、1015.90±249.77 mm~3(治疗组),抑瘤率约为43.52%、36.29%、25.94%。治疗后第1、5、10天,治疗组皮下肿瘤体积显著小于对照组(P<0.05),结论:1、雷帕霉素在体外能明显抑制SHI-1细胞增殖并诱导细胞凋亡,作用效果呈时间、剂量依赖。与对照组相比,低浓度的雷帕霉素处理组CAV1、caspase3、Bax、表达升高,Bcl-2蛋白表达下降。2、雷帕霉素能有效抑制SHI-1细胞在裸鼠体下的增殖,对皮下白血病瘤起到治疗作用。