【摘 要】
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目的建立体外诱导的酒精性脂肪肝细胞模型,并探讨甘利欣、川芎嗪对体外诱导的酒精性脂肪肝细胞的影响。方法采用MTT法筛选乙醇诱导浓度、甘利欣和川芎嗪作用浓度,流式细胞术
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目的建立体外诱导的酒精性脂肪肝细胞模型,并探讨甘利欣、川芎嗪对体外诱导的酒精性脂肪肝细胞的影响。方法采用MTT法筛选乙醇诱导浓度、甘利欣和川芎嗪作用浓度,流式细胞术检测细胞周期变化,光学显微镜观察油红O染色情况、透射电镜观察细胞超微结构改变,全自动生化仪检测细胞内甘油三酯(TG)水平,ALT、AST、GGT试剂盒检测培养基中酶泄露量,免疫细胞化学方法观察PPARγ、SREBP-1、SCAP、NF-κB、Bcl-2的表达。结果1. MTT法筛选出浓度为0.28%的乙醇作用于L02细胞,连续培养诱导至30代,将之命名为Ld30细胞。与L02细胞相比,Ld30细胞内TG水平显著升高(P<0.01);油红O染色后光镜下观察见Ld30细胞浆内有大量大小不一、被染成橘红色的脂滴,透射电镜观察时也发现胞浆内存在大量脂滴;免疫细胞化学结果显示:与L02细胞相比,PPARγ、SREBP-1、SCAP在Ld30细胞表达明显增强(P<0.01)。2. MTT法筛选出浓度分别为2.273μg/ml的甘利欣和8.182μg/ml的川芎嗪作为观察这两种药物对Ld30细胞影响时的作用浓度。与Ld30组相比,甘利欣处理组、川芎嗪处理组细胞内TG水平及ALT、AST、GGT泄漏量均显著降低(P<0.01);FCM结果显示:Ld30细胞凋亡率2.94%,
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