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苏丹红是一种人工合成的红色染料,主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型,被广泛用于溶剂、油、蜡、汽油的增色以及鞋、地板等增光方面,然而苏丹红也被非法添加入食品中以保持其色泽。研究表明,苏丹红对小鼠淋巴瘤细胞有显著的细胞毒性和致突变作用,摄入含较高剂量苏丹红的食品就会增加致癌的危险性。本研究中我们进一步阐明苏丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的致突变分子机制,本试验采用“小鼠淋巴瘤细胞L5178Y/TK+/-致突变检测方法”(L5178Y/TK+/- Mouse Lymphoma Mutation Assay,MLA)来获得胸苷激酶基因(tk)突变克隆。为了检测含功能性tk基因的11号染色体(11b)上DNA断裂情况,我们挑取对照组和经不同浓度苏丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ处理小鼠淋巴瘤L5178Y tk+/--3.7.2细胞得到的tk基因突变克隆,提取DNA,用基于PCR的杂合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)的分析方法考察11号染色体上分布的tk位点的杂合性缺失情况。最后通过Hoechst33342/PI双荧光活染法检测经苏丹Ⅲ和Ⅳ处理的细胞凋亡情况。从检测结果来看150μg/mL苏丹Ⅰ诱导的突变体中大克隆和小克隆发生LOH的比例分别为85%(17/20)、95%(19/20),所有克隆发生LOH的比例为90%(36/40);150μg/mL苏丹Ⅲ诱导的突变体中大克隆和小克隆发生LOH的比例分别为85.2%(23/27)、100%(15/15),所有克隆发生LOH的比例为90.5% (38/42);500μg/mL苏丹Ⅳ号组中大克隆和小克隆发生LOH的比例分别为83.3%(15/18)、90.9%(19/22),所有克隆发生LOH的比例为85% (34/40)。Hoechst33342/PI双荧光活染法表明在苏丹Ⅲ作用12、24和48小时其凋亡率分别为10.5%、29.5%、52.5%,在苏丹Ⅳ作用12、24和48小时其凋亡率分别为14.5%、28.0%、49.5%,随诱导时间的延长,凋亡率增高,呈时间依赖关系。