高压氧辅助抗蛇毒血清治疗对五步蛇中毒大鼠肾保护作用研究

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目的:通过五步蛇毒中毒大鼠模型,观察五步蛇毒中毒后肾组织的病理变化过程,并探讨HBO辅助抗蛇毒血清治疗对五步蛇毒中毒大鼠肾的保护作用。方法:将96只健康成年雄性SD大鼠随机分为空白对照组、蛇毒中毒组、血清治疗组、血清+HBO治疗组,每组24只。经尾静脉注射五步蛇蛇毒建立中毒模型,血清治疗组于建模成功后即从尾静脉注射抗蛇毒血清,血清+HBO治疗组于注射抗蛇毒血清后0 h、4 h、11 h、23 h予以HBO治疗一次,空白对照组不予任何处理。各组部分大鼠于注毒后1 h、5 h、12 h、24 h经腹主动脉采血用于检测凝血功能、肾功能、血清MDA和SOD,另部分大鼠用生理盐水及多聚甲醛经左心室灌注固定肾组织,并取右肾组织行HE染色观察病理变化。结果:(1)中毒后大鼠的表现:中毒大鼠出现烦躁、竖毛、活动及进食水减少、皮肤内脏出血、血尿等,肾脏肉眼观察有明显充血。(2)肾组织病理改变:蛇毒中毒大鼠出现肾小球出血、肾小囊扩张,周围毛细血管存在不同程度的充血,肾小管管腔扩张,可见细胞低平,刷状缘脱落,肾小管上皮细胞空泡化,肾间质组织炎性细胞浸润。随着时间的推移肾出血减少,炎性细胞浸润增加。以上病变在抗蛇毒血清治疗后显著改善,在血清+HBO治疗后1h、5h改善较单纯蛇毒血清治疗明显。(3)肾功能结果:与空白对照组比较,蛇毒中毒组各时间点的血Cr显著升高(P<0.05)。与蛇毒中毒组比较血清治疗组、血清+HBO治疗组在1 h血Cr值显著降低(P<0.05),其中血清+HBO治疗组血Cr值明显低于血清治疗组(P<0.05)。(4)凝血功能结果:与空白对照组比较,蛇毒中毒组各时间点的APTT、PT显著升高(P<0.05)。与蛇毒中毒组比较,血清治疗组、血清+HBO治疗组APTT值均明显降低。在注毒1h、5h血清+HBO治疗组APTT值又明显低于血清治疗组(P<0.05)。PT值血清治疗组、血清+HBO治疗组各时间点比较无差异(P>0.05)。与空白对照组比较,蛇毒中毒组FIB于注毒后1 h明显降低(P<0.05),予以血清、血清+HBO治疗后明显上调,但血清治疗组、血清+HBO治疗组两组间无差异。(5)血清MDA、SOD结果:蛇毒中毒组各时间点MDA值显著高于空白对照组(P<0.05)。血清治疗组各时间点MDA值较蛇毒中毒组下降(P<0.05),血清+HBO治疗组较单纯血清治疗组1 h、5h下降(P<0.05)。血清治疗组SOD值1 h、5 h较蛇毒中毒组明显上调(P<0.05),血清+HBO治疗组各时间点较蛇毒中毒组明显上调(P<0.05),血清+HBO治疗组1h较血清治疗组明显上调(P<0.05)。结论:(1)五步蛇毒中毒可导致大鼠肾损伤。(2)HBO辅助抗蛇毒血清治疗对五步蛇中毒大鼠肾损伤有保护作用,越早采用其保护效应越佳。
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