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目的：目前脂多糖诱导的甲型肿瘤坏死因子（lipopolyaccharide-induced tumornecrosis factor alpha factor, LITAF）与肿瘤之间的关系刚引起人们的注意，在人体内它可能发挥着肿瘤抑制功能。本研究通过构建稳定的细胞株，在体外研究LITAF对肿瘤的抑制作用，并探索其可能的肿瘤抑制机制，为进一步研究提供实验依据。方法：1制备含pSuperRetro-LITAF-shRNA/shRNA-Control重组质粒的包装病毒，然后感染肺癌细胞系A549，puromycin筛选获得稳定细胞株A549-LITAF-shRNA与A549-shRNA-C。2通过MTT、细胞软琼脂非贴壁性生长（Anchorage independent growth）、细胞划痕（Scratch wound healing）等试验比较这两种细胞的生物学行为，以了解LITAF对于肿瘤细胞恶性生物学行为改变的影响。3通过microarray分析A549-LITAF-shRNA与A549-shRNA-C两个细胞中miRNA的表达差异，找寻受LITAF调控的miRNA。应用靶基因预测软件（TargetScan等）预测并通过Western Blot及qPCR验证miRNA介导，受LITAF调控的下游基因。结果：1Western Blot结果显示，筛选出的A549-LITAF-shRNA单克隆细胞株中的LITAF蛋白表达量（LITAF/β-actin，0.09）与A549-shRNA-C细胞克隆株（LITAF/β-actin，0.45）比较，干扰组中LITAF的表达量明显低于对照组，且表达差异有统计学意义（P＜0.01），提示细胞株构建成功。2MTT结果表明A549-LITAF-shRNA干扰组与A549-shRNA-C（scrambled）对照组相比，A549-LITAF-shRNA组的增值能力明显增强（P＜0.01）；细胞软琼脂非贴壁性生长试验结果显示LITAF干扰表达的细胞株的集落形成能力明显强于对照组；而细胞划痕实验结果提示LITAF被干扰表达后，A549肺癌细胞的迁移能力有所增强。通过以上研究我们可以得出，LITAF的表达能够抑制A549肺癌细胞的增殖与迁移，而LITAF表达缺失会加重肿瘤细胞恶性程度。3通过microarray技术比较发现， miRNA-15a/128/192/194在A549-LITAF-shRNA细胞株中的表达量较对照细胞株明显下降，随后的荧光定量PCR结果也证实了LITAF与这四个miRNA的关联性。通过靶基因预测软件定位，并查阅文献，本研究发现癌基因Bmi-1可能受LITAF负调控，通过蛋白及mRNA表达情况检测显示与对照组相比，LITAF表达缺失的情况下，Bmi-1的表达量明显升高（P＜0.05）。因此，LITAF能够抑制癌基因Bmi-1的表达可能为LITAF发挥肿瘤抑制功能的机制之一。结论：LITAF能够发挥肿瘤抑制功能，这可能是通过调节miRNA与Bmi-1实现的。