盐霉素对乳腺癌细胞系MCF-7及其癌干细胞的抑制和杀伤作用

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目的:研究盐霉素体外作用于乳腺癌MCF-7细胞,对其抑制、杀伤作用以及细胞形态学和肿瘤干细胞比例的影响,初步探讨盐霉素对乳腺癌MCF-7细胞及其干细胞作用的可能机制。方法:1.用100、50ug/ml等8个不同浓度的盐霉素作用于乳腺癌细胞MCF-7,以多西他赛、为阳性对照,CCK-8法检测半效浓度(IC50,ug/ml),比较其对乳腺癌细胞MCF-7的抑制差异;2.通过贴壁和无血清悬浮的方法培养乳腺癌MCF-7细胞,并用流式细胞技术检测其表面干细胞标志物CD44+CD24-/low的表达,观察其在无血清悬浮培养下的成球能力以及加入药物后对其成球能力的影响;3.通过流式分析技术检测比较经药物处理后的乳腺癌MCF-7细胞中干细胞的比例变化;4.用westernbolt法检测P-糖蛋白(PGP)的表达变化。结果:1.无血清悬浮培养添加细胞因子的方法培养出的悬浮细胞球高表达CD44抗原,CD24抗原低表达或阴性,,表明该方法能富集乳腺癌干细胞;2.与多西他赛、相比,盐霉素对乳腺癌细胞具有更强抑制和杀伤作用,能特异性杀伤乳腺癌干细胞,对成球能力的影响更明显;3.盐霉素组癌细胞PGP表达也明显低于其他组。结论:乳腺癌MCF-7细胞及其肿瘤干细胞对盐霉素药物敏感性高于多西他赛,盐霉素可能降低乳腺癌干细胞表面的P-糖蛋白表达而提高其药物敏感性。
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