【摘 要】
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目的：本课题通过检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导内皮祖细胞(EPCs)凋亡后凋亡率及转录因子FoxO4表达的变化,探讨FoxO4参与AngⅡ诱导的EPCs凋亡的机制。方法：采集产后2小时内人脐静
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目的：本课题通过检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导内皮祖细胞(EPCs)凋亡后凋亡率及转录因子FoxO4表达的变化,探讨FoxO4参与AngⅡ诱导的EPCs凋亡的机制。方法：采集产后2小时内人脐静脉血,从中提取单个核细胞,在培养基中加入血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导培养7天后鉴定为EPCs。依据不同干预方式对标本进行分组：①AngⅡ组(n=6),加入浓度为10-6mol/L的AngⅡ诱导EPCs凋亡；②AngⅡ+氯沙坦钾+PD123319组(n=6),加入AT受体拮抗剂10-6mol/L的氯沙坦钾和10-6mol/L的PD123319进行干预,1小时后加入浓度为10-6mol/L的AngⅡ；③设立空白对照组(n=6),对标本不进行任何干预。在分组干预24小时后对各组标本进行检测。流式细胞仪(Annexin V/PI双染色法)检测各组细胞凋亡率；免疫组织化学方法观察FoxO4在各组EPCs的表达水平。结果：①AngⅡ组细胞凋亡率最高,与空白对照组相比有显著升高(P<0.05), AngⅡ+氯沙坦钾+PD123319组细胞凋亡率次之,与对照组相比凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。AngⅡ可以诱导EPCs凋亡,这一凋亡过程可以被AT受体拮抗剂阻断,减少EPCs的凋亡。②免疫组织化学结果显示AngⅡ组FoxO4表达阳性率最高,空白对照组中FoxO4表达阳性率最低,AngⅡ+氯沙坦钾+PD123319组FoxO4表达阳性率处于二者之间,AngⅡ组FoxO4阳性率与空白对照组有显著差别(P<0.05), AngⅡ+氯沙坦钾+PD123319组FoxO4阳性率与空白对照组比较无显著差异(P>0.05)③转录因子FoxO4阳性表达与各组EPCs细胞凋亡率的变化一致。结论：①浓度为10-6mol/L的AngⅡ可以诱导内皮祖细胞凋亡,AngⅡ诱导内皮祖细胞凋亡的过程可以被其受体拮抗剂AT1和AT2受体拮抗剂阻断；②转录因子FoxO4的表达阳性率与细胞凋亡率变化一致,提示FoxO4转录因子参与了高浓度(10-6mol/L) AngⅡ诱导的EPCs凋亡过程。
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