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第一部分COVID-19患者外周血淋巴细胞和细胞因子谱动态变化特征目的:研究COVID-19患者外周血淋巴细胞亚群和细胞因子谱的动态变化特征及其与疾病严重程度的关系。方法:多时间点收集2020年1月5号到1月24号武汉协和医院收治的40例核酸确诊为COVID-19患者的外周血标本,并通过流式细胞术和特异性免疫测定法检测淋巴细胞亚群以及细胞因子。结果:在确诊的40例COVID-19患者中,相比较于27例轻型患者[淋巴细胞:1.10（0.83-1.38）×10~9/L;中性粒细胞:1.98（1.48-2.91）×10~9/L],13例重型患者外周血淋巴细胞计数绝对值显著降低且持续下降[0.65（0.56-0.79）×10~9/L],但中性粒细胞计数绝对值却升高[4.66（3.56-5.84）×10~9/L]。进一步的分析表明,与轻型患者相比,重型患者外周血中T细胞（尤其是CD8+T细胞）的数量显著减少,并且外周血中IL-6、IL-10、IL-2和IFN-γ水平升高。存活的重型COVID-19患者的外周血T细胞计数和细胞因子水平在随后的时间点逐渐恢复至与普通型病例相当的水平。此外,中性粒细胞与淋巴细胞绝对值之比（NLR）（AUC=0.93）和中性粒细胞与CD8+T细胞绝对值之比（N8R）（AUC=0.94）被证实为是预测COVID-19重症化的有力指标。结论:重型COVID-19患者外周血淋巴细胞减少和炎症因子风暴的程度高于轻型患者,并且与疾病的严重程度相关。N8R和NLR可作为早期COVID-19患者重症化的有效预测指标。第二部分糖皮质激素和肝素治疗分别对COVID-19患者外周血CD8+T细胞以及D-二聚体水平的影响目的:重型COVID-19患者被证实存在炎症风暴与免疫功能紊乱,伴随外周血T淋巴细胞（CD8+T细胞）显著降低和D-二聚体升高。本研究旨在探索两种分别治疗炎症风暴和深静脉血栓的常用药物糖皮质激素和低分子肝素对COVID-19患者外周血CD8+T淋巴细胞和D-二聚体的影响,为其临床应用提供依据。方法:在这项回顾性队列研究中,来自于武汉协和医院及武汉市中心医院共计866名COVID-19患者入组。患者根据疾病严重程度被分为三型（轻型、重型和危重型）,我们使用广义加性模型来拟合凝血和免疫的关键指标随时间变化的动态曲线。得到相关指标的总体变化趋势后,我们通过线性混合模型校正混杂因素的影响以及个体水平的差异,以分段回归的形式来检验不同的给药剂量和治疗开始时间对相应靶指标的变化速率的影响。结果:总计有541名轻型,169名重型和156名危重型患者。在危重型患者中,0到14天的D-二聚体呈上升趋势,而CD8+T细胞百分比呈下降趋势;14天到28天D-二聚体呈现下降趋势,而CD8+T细胞百分比呈上升趋势。对于重型或者危重型COVID-19患者而言,在首发症状14天以内使用甲泼尼龙（β=0.154,95%CI=（0,0.302）,p=0.048）,或者使用剂量小于40mg/天的患者（β=0.163,95%CI=（0.027,0.295）,p=0.020）,比在首发症状14天后或者使用剂量等于40mg/天的患者,CD8+T淋巴细胞百分比的回升速度显著升高。相反的,在起病14天内使用低分子肝素治疗与0-14天（β=-0.147,95%CI=（-1.043,0.675）,p=0.745）和14-56天（β=-0.108,95%CI=（-0.376,0.135）,p=0.410）时间范围内D-二聚体的变化速率均无关。简言之,与起病14-56天内使用低分子肝素抗凝治疗相比,起病0-14天使用低分子肝素抗凝治疗对起病0-14天和14-56天内的D-二聚体的变化速率没有显著影响。结论:早期小剂量糖皮质激素治疗能加速疾病早期下降的CD8+T淋巴细胞的回升,从而有助于重型患者免疫力增强,阻止病情重症化。而低分子肝素抗凝治疗时间的早晚对D-二聚体的变化没有显著影响。第三部分COVID-19康复患者SARS-Co V-2特异性记忆T细胞应答特征研究目的:全球COVID-19二次感染的病例被陆续报道,由SARS-Co V-2原发感染诱导的细胞和/或体液免疫能否保护人群免受二次感染备受质疑。本研究旨在探索COVID-19康复患者体内记忆性T细胞应答的特点,为疫情防控提供科学依据。方法:收集自2020.4.1以来就诊于华中科技大学同济医学院附属协和医院COVID-19康复门诊患者的外周血和临床资料。流式细胞术检测COVID-19康复者外周血SARS-Co V-2特异性记忆T细胞应答特征。结果:共计纳入36例COVID-19康复患者。36例康复患者中依据起病时疾病严重程度分为无症状型（AC）9例,普通型（MC）20例,重型（SC）7例。起病与抽血之间的中位数时间为187天（范围:83至354天）。在具有不同疾病严重程度的COVID-19康复患者中,记忆CD4+和CD8+T细胞应答存在强度和幅度的差异。总体上,AC组的SARS-Co V-2记忆T细胞针对S,N或M抗原的整体或单个细胞因子生成的应答强度均低于MC组和SC组,但差异无统计学意义（p>0.05）。但是,AC组的记忆CD4+和CD8T+细胞应答的幅度与MC和SC组的记忆CD4+和CD8 T+细胞应答幅度有明显差异。在AC组中,44.44%（4/9）的康复者无法检测到针对S,N和M抗原的记忆性CD4+T细胞应答,而在MC组和SC组,仅有5.00%（1/20）和14.29%（1/7）的康复者未检测到针对这三种主要SARS-Co V-2抗原的记忆性CD4+T细胞应答（p=0.022）。类似的,仅有44.44%（4/9）的AC康复者,但60.00%（12/20）的MC和71.43%（5/7）的SC康复者显示出针对所有三个肽库的记忆性CD4+T细胞应答。相比较于记忆性CD4+T细胞应答,66.67（6/9）的AC康复者未检测到针对S,N和M抗原的记忆性CD8+T细胞应答,但在MC组和SC组康复者中,这一比例分别为15.00%（3/20）和14.29%（1/7）。在AC组康复者中,没有显示针对多个肽库的记忆CD8+T细胞应答,而60.00%（12/20）的MC和71.43%（5/7）的SC康复者显示出对至少2种不同的肽库的记忆性CD8+T细胞应答。针对S、N和M抗原的SARS-Co V-2记忆CD4+T细胞应答与TB、ALT、AST、LDH、D-Dimer,FIB水平总体上总体上呈现正相关,而与WBC、IL-6和CRP水平总体上呈现负相关,但是没有统计学意义（p>0.05）。而在记忆CD8+T细胞应答中未观察到此趋势。结论:SARS-Co V-2长效记忆性T细胞（CD4+T细胞和CD8+T细胞）应答在大部分COVID-19康复者可被检测到;相比较于无症状康复者,重型COVID-19康复者的SARS-Co V-2特异性记忆T细胞应答持续时间更久。