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以RT-nPCR扩增戊型肝炎病毒猪源株swCH25 ORF2基因片断，并将其插入到pMD18-T simple载体中，构建克隆载体pMD-ORF2。克隆的基因片段长916bp，编码305个氨基酸。与不同基因型部分代表株氨基酸序列比对分析发现，与基因型Ⅳ的同源性最高，为98.0％-98.7％；与基因型Ⅱ的同源性最低，为90.8％；与基因型Ⅰ和Ⅲ同源性分别为92.5-92.8％和95.1-95.7％。用DNAStar Protean分析，swCH25株ORF2 C端片断与其它株相应片断抗原性预测结果基本一致。 对克隆载体pMD-ORF2进行双酶切，将得到的926bp片段以正确的阅读框架定向克隆于pET-32a（+）中，然后将重组质粒转化进宿主菌BL21中，在37℃1.0mM IPTG诱导下该片段获得良好表达。经SDS-PAGE鉴定，其表达的融合蛋白约为55.9kD，与预期值一致。经Ni2+亲和层析柱纯化后，得到单一的目的蛋白条带。免疫转印试验显示，该重组蛋白可被猪或人HE阳性血清识别，表明该重组蛋白具备HEV天然毒株抗原性，且与人HEV存在抗体交叉反应性。重组蛋白尿素洗涤上清作SDS-PAGE和Western blot，均显示表达的蛋白在体外可形成二聚体和多聚体。 以HEV中国猪源株ORF2（367-671aa）基因工程表达蛋白p305ORF2作为包被抗原，以猪HEV阳性血清作为第一抗体，以HRP标记的SPA（HRP-SPA）代替酶标抗体作间接ELISA来检测猪血清中的HEVIgG。方阵滴定试验确定，p305ORF2的最佳包被浓度约为62ng／孔，猪血清的最佳稀释度为1∶10，HRP-SPA代替酶标二抗其工作浓度为1∶10000，将建立的ELISA方法命名为p305ORF2 ELISA。随机选取91份猪血清，分别用p305ORF2 ELISA和HEV总抗体检测试剂盒（北京万泰）两种方法检测HEV，结果表明p305ORF2 ELISA检出IgG74份阳性（阳性率为81.32％），万泰试剂盒检出84份IgM及IgG阳性（阳性率为92.31％），两种方法的符合率为84.62％（77／91）。用p305ORF2 ELISA检测采自江苏、山东和河南三省的820份猪血清样本中的HEV IgG抗体，调查这些地区猪HEV的感染状况。结果表明，江苏地区阳性率54.53％（343／629），山东地区阳性率46.05％（70／152），河南地区阳性率66.67％（26／39），总阳性率53.54％（439／820）。结果提示在中国江苏、河南和山东地区普遍存在猪感染HEV的情况。