甲胎蛋白(AFP)是迄今为止发现的原发性肝癌最灵敏、最特异的肿瘤标志物,70-95%的原发性肝癌患者呈现AFP水平升高,血液中甲胎蛋白水平对于肿瘤的早期发现,病情的发展、治疗后的评价、监测复发和转移等方面都具有一定的应用价值。本论文主要进行磁微粒甲胎蛋白(AFP)化学发光免疫检测系统的研究与临床研究,在磁微粒包被技术平台和化学发光技术平台上,结合双抗体夹心法的免疫学反应技术优势,开发出诊断试剂盒,用于人血清中甲胎蛋白的检测。研究方法与结果：1.甲胎蛋白定量检测试剂盒的研发：主要包括生物活性原材料的筛选,磁微粒的包被、酶结合物和校准品生产工艺研究、试剂盒反应体系研究、正常参考值的确定以及稳定性研究。(1)磁微粒包被工艺：本试剂盒固相载体选用羧基磁微粒,包被方法确定为羧基两步；(2)试剂盒反应体系：采用两步法反应模式,第一步：25μl样本+20μl磁微粒+50μl样品稀释液,37℃温育15min,洗涤6次；第二步：加入100μl酶结合物,37℃温育15min,洗涤6次；分别加入底物A、底物B各50μl震荡混匀后,避光5-10min内测定。(3)参考值的确定：检测615例正常人样本,通过百分位数法确定参考值为10.0ng/ml。(4)稳定性研究：对产品进行了加速稳定性和实时稳定性研究。分别于37℃加速破坏条件下放置10天和实际储存条件2-8℃放置14个月后对试剂盒进行检测,产品的各项性能指标仍能够满足产品标准的要求。将产品的效期定为2-8℃储存12个月是安全合理的。2.甲胎蛋白定量检测试剂盒性能评价(1)准确性：用参考物质作为样本进行检测,试剂盒准确性均值在0.900-1.100范围内。(2)最低检测限：最低检出限不大于1.8ng/ml。(3)剂量-反应曲线线性：在1.8-1000ng/ml线性范围内,试剂盒的相关系数r应≥0.9900(4)精密性：用不同浓度的样本各重复检测10次,其变异系数(CV)应不大于10%(5)批间差：批间变异系数(CV)应不大于15.0%(6)特异性：人血清白蛋白(500ng/ml)、HCG(1000IU/ml)、PRL(500ng/ml)均无交叉反应性。(7)干扰物质：50mg/dl胆红素、81mg/dl血红蛋白、3000mg/dl脂质对本试剂盒无干扰作用。3.甲胎蛋白定量检测试剂盒(磁微粒化学发光法)的临床研究：以已上市同品种试剂盒为对照,通过对原发性肝癌术前及术后监测、肝部良性疾病和其他肿瘤患者血清合计1173例临床检验样本进行对比检测,结果显示,本试剂盒与对照试剂盒相比,阴性符合率为97.85%,阳性符合率为98.32%,总符合率为98.04%,相关系数为0.9971。可以用于临床AFP含量的检测。结论：本研究选择高特异性和高灵敏度的单克隆抗体包被,建立开发出磁微粒化学发光法检测AFP系统,灵敏度、特异性、稳定性等各项主要指标可以达到国内领先水平,跻身国际先进水平行列,且操作简便快速,易实现自动化操作,能够更好地满足国内临床使用需求。