论文部分内容阅读
目的：通过优化木蝴蝶总黄酮的提取和纯化条件，并进行含量测定；同时检测木蝴蝶总黄酮的体外抗氧化、抗肿瘤作用及大鼠体内药代动力学指标，为木蝴蝶总黄酮的进一步分离、活性部位或单体化合物的制备提供实验依据。方法：采用溶剂提取分离的方法，从木蝴蝶中提取纯化总黄酮类化合物；UV法测定黄酮化合物清除羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的能力；MTT法检测OF-60对MCF-7增殖抑制作用；流式细胞术检测OF-60对MCF-7细胞凋亡影响；HPLC测定木蝴蝶黄酮含量及粗提取物OFC在大鼠体内药代动力学。结果：1）木蝴蝶总黄酮的最佳提取工艺条件是：用70%（V/V）乙醇溶液、温度70℃、木蝴蝶粗粉与固液比为（1:8）、水浴回流三次，每次2小时，其提取率为19.50%。木蝴蝶总黄酮粗提物分离纯化最佳实验条件为：用HPD100型大孔树脂，洗脱溶液为60%（V/V）乙醇，洗脱速度为1.0BV/h，洗脱体积为5.0BV，洗脱率高达90%以上。2）木蝴蝶与不同浓度乙醇洗脱黄酮部位的体外抗氧化实验的结果：①对于羟自由基的清除能力从大到小依次为：OF-60> OF-80> OFC>OF-40；②对于超氧阴离子自由基与DPPH的清除能力从大到小依次为：OF-60>OFC> OF-80> OF-40；并均随浓度的增加其抗氧能力增强。3）在0-1000μg/mL范围内，OF-60对MCF-7细胞增殖抑制作用随浓度的增加而增强，其中浓度为1000μg/mL的OF-60对MCF-7细胞增殖抑制率达39.94%，与对照组比较呈显著差异性（P＜0.01vs正常组）。浓度为0μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL的木蝴蝶黄酮OF-60诱导MCF-7细胞的凋亡率分别为：3.89%、11.07%、21.32%和24.19%。4）以槲皮素为检测指标，木蝴蝶黄酮粗提物在大鼠体内药物代谢过程：t1/2=2.62±0.26h，Cmax=372.93±61.72，V/F=0.41±0.26，符合一室开放模型。结论：1）70%乙醇溶剂提取和HPD100型大孔树脂纯化为木蝴蝶黄酮提取纯化的最佳实验条件；2）木蝴蝶黄酮具有较强的抗氧化能力，其中OF-60对MCF-7细胞有明显抑制增殖与诱导凋亡作用；3）以槲皮素为检测指标，木蝴蝶粗提物在大鼠体内药物代谢过程，符合一室开放模型。