背景结肠癌是世界范围内高发的消化系统恶性肿瘤,在男女性中均高发,严重影响人群的健康。虽然传统的手术和放化疗可以一定程度上延长患者的生存期,但是晚期结肠癌患者,特别是伴有转移的患者,死亡率还是很高。目前对于癌症治疗,提出了更有针对性的新方案-癌症靶向治疗,与传统的化疗相比较,靶向治疗能更有效更精准的作用于癌症细胞,降低药物引起的不良反应,寻找新的治疗靶点成为目前研究的主要方向。文献报道显示,酪蛋白激酶CK1在多种癌症组织中呈现高表达,靶向CK1激酶家族成为治疗癌症的新方向。但是CK1激酶家族对结肠癌的调控及可能的机制还不是很清楚,CK1激酶抑制剂是否可以影响结肠癌细胞的生物学行为以及可能的联合作用策略还未见报道。目的明确CK1激酶抑制剂对结肠癌细胞存活、凋亡和自噬的影响,阐明自噬在CK1激酶抑制剂诱导结肠癌细胞死亡中的作用,为临床靶向治疗结肠癌和新的联合治疗策略的提出提供一定的方向和理论依据。方法1.体外培养不同结肠癌LOVO和RKO细胞,分别给予CK1激酶抑制剂D4476和IC261处理结肠癌细胞,利用CCK8检测抑制剂对结肠癌细胞存活率的影响,2.利用Western blotting检测结肠癌细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和细胞色素C表达水平。3.CK1激酶抑制剂IC261处理结肠癌细胞后,利用Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-II、Beclin1蛋白表达水平。4.使用CK1抑制剂IC261联合自噬抑制剂3-MA和氯喹,CCK8检测结肠癌细胞存活率;5.Western blotting检测联合作用后凋亡相关蛋白cleaved caspase-3表达水平。结果1.CCK8结果显示,不同浓度的D4476和IC261可以明显诱导结肠癌LOVO和RKO细胞存活率的下降,呈现一定的剂量和时间依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.Western blotting结果显示,不同浓度的IC261明显增加LOVO和RKO细胞内凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、线粒体凋亡信号分子细胞色素C表达水平3.Western blotting结果显示,IC261可以引起细胞内自噬相关蛋白LC3-II、Beclin1的表达水平的升高。4.CCK8结果显示,IC261联合自噬抑制剂3-MA或者氯喹可以进一步诱导RKO和LOVO细胞存活率下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.Western blotting结果显示,CK1抑制剂IC261联合自噬抑制剂3-MA或者氯喹可以进一步诱导RKO和LOVO细胞中cleaved caspase-3表达水平增高。结论CK1激酶抑制剂可以明显降低结肠癌细胞存活率,诱导细胞通过线粒体凋亡信号通路发生凋亡。CK1激酶抑制可以诱导结肠癌细胞自噬的发生,抑制自噬可以进一步增加CK1激酶抑制剂诱导的结肠癌细胞死亡。