傣药竹叶兰解毒和抗感染药效物质基础及药理活性研究

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竹叶兰(Arundina graminifolia(D.Don)Hochr.)是兰科(Orchidaceae)竹叶兰属(Arundina)植物,在少数民族中被用于治疗食物及药物中毒、风湿、肺部感染、尿路感染。但迄今未见其解毒、抗感染等药理活性的报道。本论文从化学和生物学角度,研究竹叶兰解毒、抗感染的活性成分及其作用机理。1.采用硅胶柱层析、重结晶等分离方法,结合NMR、IR、UV、MS等波谱数据,从竹叶兰乙酸乙酯部位共分离、鉴定了7个化合物,分别为:2,2’,7,7’-四羟基-4,4’-二甲氧基-9,9’10,10’-四氢-1,1’-联菲(1,blestriarene A),2,7-二羟基-1-(对羟基苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲(2,shancidin),7-羟基-2-甲氧基-菲-1,4-二酮(3,densiflorol B),7-羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲-1,4-二酮(4,ephemeranthoquinone),2,7-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(5,coelonin),4,7-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲(6,lusianthridin),谷甾醇-3-O-葡萄糖苷,(7,daucosterin)。其中化合物1为首次从竹叶兰中分离得到。2.通过DPPH自由基和H2O2诱导的溶血实验证实了竹叶兰乙酸乙酯部位具有最强的抗氧化活性;抗菌实验结果表明竹叶兰乙酸乙酯部位具有广谱的抑菌活性。3.本研究通过最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC)的测定评价了化合物1-4的抑菌活性。结果表明,化合物1和2对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌有显著的抑菌作用,化合物1-2的MIC范围为20-40μg/ml,MBC范围为40-320μg/ml。化合物3对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的杀菌效果好于大肠杆菌、沙门氏菌,MIC范围为20-80μg/mL,MBC范围为160-320μg/mL。通过透射电镜研究化合物1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌机理,发现化合物1能够破坏金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的细胞膜和细胞壁的完整性,导致细胞内物质外泄,细胞裂解。4.化合物1-3能够削弱金黄色葡萄球菌外毒素的毒性。体外红细胞溶血实验表明,化合物1-3能够减弱金黄色葡萄球菌外毒素对红细胞的损伤,维持红细胞形态特征,对金黄色葡萄球菌外毒素诱导的红细胞溶血的最高抑制率分别为55.36%,56.69%,52.92%。综上所述,竹叶兰能够抑制微生物生长,是一种有前景的抗感染药物来源。菲类化合物可能是其活性成分。
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