研究背景及目的：血栓性疾病主要包括深静脉血栓形成（deep venous thromboembolism，DVT）和肺动脉栓塞（pulmonary embolism，PE）等。DVT是血管外科常见病之一，外科大手术未采取预防措施者，DVT的发病率为25％，尸检发现率为35％—52％。DVT急性期的并发症有肺栓塞及股白肿或股青肿，慢性期将遗留血栓形成后综合征，前者是导致DVT病人死亡或截肢的主要原因；后者将造成程度不一的慢性深静脉功能不全，严重影响患者的生活和工作能力。PE是DVT最严重的并发症之一，大块脱落的血栓引起肺动脉主干或大的分支栓塞，可导致病人在短期内死亡。 目前国内外治疗DVT的方法较多，主要有：抗凝、溶栓（包括经外周静脉全身给药溶栓和经导管局部给药溶栓）、手术取栓和微创介入治疗。以上治疗方法虽然对深静脉血栓形成均有一定的治疗作用，但都难以达到理想的疗效，同时也都存在各自的副作用。因此，探索DVT新的治疗方法就成为解决问题的关键。 尿激酶（urokinase，UK）是临床上常用的溶栓药物，但该药具有较强的引起出血的倾向，在一定程度上限制了其临床应用。如能将尿激酶制备成具有缓释作用的纳米粒（nanoparticle，NP），理论上可减轻其出血倾向的副作用，提高治疗效果。 纳米科学自20世纪被发现之后，在医学领域的研究已取得大量卓越的成绩。通过抗癌药物的靶向治疗、纳米磁靶向动态成像、纳米粒靶向基因治疗等研究，证明纳米粒具有很好的靶向性、缓释性以及其本身的可修饰性，使得药物在靶器官的浓度明显增加，半衰期显著延长，药物的毒副作用大大减少。然而，在血管疾病的研究方面，以载药纳米粒溶栓的研究在国内外报道仍然较少。 由于聚乳酸/乙醇酸共聚物（poly lactic—co—glycolic acid，PLGA）具有以下一些性质，选择其作为尿激酶的载体，使其适合应用于控制给药及靶向治疗：PLGA的生物相容性和可降解性；实验动物研究表明其静注给药后在血液中具有持久性；PLGA不仅对亲脂性药物具有很好的包封性质，而且对蛋白质药物也表现出令人满意的包封效果；最后，制成的PLGA纳米粒可以在适宜的条件下冷冻干燥成粉末后储存。 本研究旨在以PLGA为包裹材料，采用复乳法制备尿激酶纳米粒，进而检测尿激酶纳米粒的各个质量指标，探索尿激酶纳米粒的制备工艺，为传统溶栓药物治疗血栓性疾病发掘新的作用途径。 方法：利用复乳法制备尿激酶纳米粒；采用纤维蛋白平板法检测尿激酶含量，绘制尿激酶标准曲线并对样品尿激酶进行定量，进而检测尿激酶纳米粒的载药量、包封率；利用正交设计优化尿激酶纳米粒制备工艺，筛选出最佳工艺处方及实验条件：以扫描电镜观察其微观形态，激光粒度分析仪检测其大小及分布；最后考察尿激酶纳米粒的体外释药。 结果：尿激酶纳米粒的平均粒径为132nm，跨距为170nm，包封率为84．70±1．67％，载药量为4．01±0．16％；电镜结果显示，外形圆整，呈球形，分散良好；其体外释药实验表明UK—NP能够持续释放UK达12d以上，具有明显的缓释效应。尿激酶体外释放的速度取决于PLGA分子量的大小：低分子量PLGA（2万）形成的纳米粒比高分子量的PLGA（4万）形成的纳米粒释放尿激酶的速度较快。 结论: 1．利用复乳法能成功制备UK—NP，其制作的纳米粒外形圆整，分散性良好。 2．UK-NP的包封率与PLGA分子量及浓度、UK浓度、超声功率、PVA浓度均有关系。 3．冻干前后纳米粒的粒径、包封率和载药量没有显著的变化，低压冷冻干燥是UK-NP可行的干燥方法。 4．UK—NP的体外释药时间与PLGA分子量有关：分子量越小，其释放速度越快。