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目的与背景:
随着目前对膀胱癌研究的不断深入,膀胱癌的治疗手段不断的完善,膀胱癌的预后有所改观。但是随着社会经济的发展,在各种因素的共同作用下,膀胱癌的发病率仍不断升高,是国内泌尿系肿瘤中发病率最高、危害最大的恶性肿瘤。分子生物学的研究证实恶性肿瘤的发生、发展是是一个多因素、多步骤的过程,其间涉及抑癌基因的失活和原癌基因的激活,而关于膀胱癌发生、发展的机制尚不清楚,且缺乏有效的早期诊断和判断预后的标记物。Bmi-1基因是多梳基因家族的成员之一的癌基因,其编码的蛋白在肿瘤的发生和发展中起着非常重要的作用。目前国内外在淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、大肠癌、前列腺癌、阴茎癌等肿瘤中研究较多,已证实其在肿瘤的发生、发展中起非常重要的作用,提示Bmi-1(B—cell—specific moloney leukemia virus insert site1)基因为一非常重要的癌基因,且对多种肿瘤的预后判断起重要的作用,成为目前肿瘤研究的热点之一,但其与膀胱癌关系的研究国内外仅有一篇报道显示Bmi-1在膀胱癌组织中高表达且与预后相关。本研究旨在进一步检测人膀胱癌组织中的Bmi-1蛋白和mRNA转录水平的表达情况,并探讨其与P16蛋白的关系。
材料与方法:
选取中山大学肿瘤防治中心2008年3月至2008年5月期间的14例膀胱癌病例,留取膀胱癌组织及癌旁膀胱粘膜组织,所有病例均经手术后病理确诊为膀胱移行细胞癌,术前均未进行放、化疗以及膀胱灌注治疗,且具有完整的临床资料和病理资料。用RT-PCR方法检测14对组织中Bmi-1的mRNA转录水平,用Western Blot方法检测14对组织中Bmi-1的蛋白表达及4对组织中的P16蛋白表大。用Quantity One program(Bio-Rad,Hercules,CA)灰度分析软件比较膀胱癌组织及癌旁正常组织中Bmi-1在mRNA转录及蛋白表达水平的差异,并分析膀胱粘膜中Bmi-1表达与P16蛋白表达的关系。统计学分析采用SPSS13.0。
结果:
1、RT-PCR检测各对膀胱癌与癌旁正常组织的灰度值比为:4.97,1.63,1.37,1.71,1.09,1.30,2.19,1.75,2.05,6.73,1.28,1.84,12.67和1.42。该结果显示,膀胱癌组织中Bmi-1在mRNA转录水平表达明显高于瘤旁正常组织(P<0.01)。
2、Western Blot检测各对膀胱癌与癌旁正常组织的灰度值比为:10.71,8.99,6.05,2.97,2.55,6.09,5.47,1.95,2.12,3.14,7.42,2.32,5.46和32.47。该结果显示,膀胱癌组织中Bmi-1蛋白表达明显高于瘤旁正常组织(P<0.001)。
3、Western Blot检测4对膀胱癌及癌旁正常组织Bmi-1与内参a-tubulin灰度值比为:0.64、2.03,0.40,3.02,0.75,1.76,0.06和0.34,P16与内参a-tubulin灰度值比为:1.09,0.07,0.54,0.07,0.64,0.06,0.34和0.04。该结果显示P16蛋白的表达与Bmi-1蛋白表达呈负相关(P<0.01)。
结论:
1、膀胱癌组织中Bmi-1在mRNA转录水平显著高于瘤旁正常组织,其差异有统计学意义(P<0.01)。
2、膀胱癌组织中Bmi-1在蛋白表达水平显著高于瘤旁正常组织,其差异有统计学意义(P<0.001)。
3、膀胱癌组织中Bmi-1的表达与P16表达呈负相关(P<0.01)。