论文部分内容阅读
目的：研究微小RNA-421(miR-421)在肺癌细胞系、肺癌组织中的表达情况，预测miR-421的潜在靶基因并加以验证，探讨miR-421在肺癌细胞增殖中的作用并研究其分子机制。 方法：①常规培养7株肺癌细胞株、留取肺癌病人的肺癌组织，QPCR检测miR-421在上述标本中的表达。②通过脂质体转染获得高表达、低表达miR-421的A549细胞，采用MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂集落形成实验研究miR-421对A549细胞增殖的影响。③Western blot检测AKT/GSK-3β通路中蛋白表达情况，探讨miR-421的作用机制。④Targetscan数据库预测miR-421潜在的靶基因，采用双荧光素酶报告系统进行验证。 结果：①miR-421在7株肺癌细胞株、肺癌组织中均表达增高，A549细胞表达水平是对照组的11倍，肺癌组织表达水平是癌旁组织的32倍。②miR-421使A549细胞增殖能力（3天时OD值为5.72±0.02）增强；体外克隆形成能力增强（2.59±0.10）。③miR-421使A549细胞蛋白表达发生变化，表达增高的蛋白有p-AKT（1.23±0.01）、p-GSK-3β（0.76±0.01）、p-Rb（0.22±0.00）、CyclinD1（0.70±0.03），表达降低的蛋白有FOXO1（0.05±0.00）、p21（0.07±0.01）。④Targetscan预测显示FOXO1可能是miR-421靶基因，双荧光素酶报告系统中miR-421使荧光强度降低（0.33±0.13）。 结论：miR-421在肺癌细胞系及肺癌组织中表达增高，miR-421促进了肺癌细胞的增殖，其机制可能与下调FOXO1激活AKT/GSK-3β通路有关，miR-421靶基因之一可能是FOXO1。