研究目的:梗阻性黄疸是肝胆外科常见的一种临床表现,主要是由于肝内、外胆管梗阻造成的胆汁郁积引起,常见于肝门部胆管癌、胰头癌等疾病。在临床上,我们发现达到相同的麻醉深度时,梗阻性黄疸患者麻醉药物的用量低于非黄疸患者。提示我们梗阻性黄疸患者对麻醉药物的敏感性增高。我们的研究已经证实:梗阻性黄疸患者对吸入麻醉药地氟烷的MAC-awake显著低于非黄疸患者,即黄疸增加了患者对吸入麻醉药的敏感性。且MAC-awake与血浆总胆红素之间存在显著负性相关关系。随后的研究发现达到相同的镇静水平(BIS=50)时,梗阻性黄疸病人对依托咪酯的需要量降低,且随着胆红素浓度的增加依托咪酯的需要量逐渐降低。梗阻性黄疸时机体处于高胆红素血症的病理状态。游离胆红素能够自由通过血脑屏障进入中枢神经系统中。即使胆红素浓度的微量增加对中枢神经系统中的星形胶质细胞和神经元也会造成损伤,从而导致细胞膜以及线粒体(能量代谢损害和细胞凋亡)的损伤,引起氧化损伤和神经递质运输的破坏。丙泊酚是目前临床上最常用的静脉麻醉药物之一,主要通过中枢神经系统中GABAA受体发挥全身麻醉的作用。GABAA受体广泛分布于中枢神经系统中。因此,我们推测梗阻性黄疸时异常升高的胆红素对中枢神经系统GABAA受体的影响改变了丙泊酚的麻醉敏感性。本实验拟通过临床试验、动物实验和电生理三个部分证明梗阻性黄疸时丙泊酚麻醉敏感性的增加及其增加的机制。研究方法:1、临床试验:选取拟进行胆道或者胰腺手术的患者35名,ASA Ⅰ～Ⅱ级。根据术前血清胆红素水平分为黄疸组和非黄疸组。以0.3mg/kg.min的速度恒速进行丙泊酚的输注。输注开始后每隔20s测试患者睫毛反射并记录睫毛反射消失的时间。通过比较两组患者睫毛反射消失时丙泊酚的需要量,观察梗阻性黄疸时患者对丙泊酚的麻醉敏感性是否发生了改变。应用多元线性相关分析丙泊酚的需要量与患者生化指标(TBil、TBA、AST、ALT和 LBA)之间的关系。2、动物实验:SD大鼠随机分为正常组、假手术组、胆管结扎7天组、胆管结扎14天组和胆管结扎21天组。通过胆总管的结扎建立梗阻性黄疸大鼠模型。通过翻正反射消失时间反映大鼠对丙泊酚的麻醉敏感性。测试结束后抽取血液和脑脊液进行生化指标的检测。进一步通过侧脑室胆红素微量给药模拟梗阻性黄疸时脑脊液中胆红素的异常升高,观察脑脊液中胆红素对丙泊酚麻醉敏感性的影响。3、电生理实验:采用SD大鼠急性分离脑片,以皮层锥体神经元为研究对象。通过全细胞膜片钳技术,在电压钳下观察给予不同浓度胆红素后对皮层锥体神经元GABA诱发的通道电流的影响。研究胆红素对GABAA受体功能的影响。结果:1、通过第一部分的临床试验我们发现:与非黄疸组相比,黄疸组患者睫毛反射消失时丙泊酚的需要量显著减少(p=0.001),即黄疸增加了患者对丙泊酚的麻醉敏感性。进一步通过多元线性回归分析发现黄疸患者睫毛反射消失时丙泊酚的需要量与血清胆红素之间存在显著的负性相关关系(R2=0.550,p<0.001)。2、通过第二部分的动物实验我们发现:胆总管结扎大鼠对丙泊酚的敏感性也出现增高,且随着梗阻时间的延长其敏感性有进一步增加的趋势。进一步通过侧脑室胆红素微量注射同样可以增加大鼠对丙泊酚的麻醉敏感性,进一步说明脑脊液中的胆红素是引起丙泊酚麻醉敏感性增加的一个重要因素。3、通过第三部分的电生理实验我们发现:正常情况下,连续给予5次GABA后,GABA诱发通道电流的幅度依次出现衰减;给予3μM胆红素可以降低GABA诱发通道电流的衰减;10μM胆红素可以显著增加GABA诱发电流的幅度。给予3μM、10μM的胆红素后电流幅度增强的神经元比例增加。结论:本研究分别从临床、动物和细胞三个层面研究了梗阻性黄疸时丙泊酚麻醉敏感性的增高及其机制。我们的实验结果表明:梗阻性黄疸时患者对丙泊酚的麻醉敏感性增高,其机制与中枢神经系统中异常升高的胆红素对中枢神经系统中GABAA受体的增强作用有关。