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目的:初步探讨黄芩苷联合连翘苷对甲型流感病毒核蛋白基因(NP基因)表达的影响,为寻找高效的抗流感病毒中药复方提供理论和实验依据。方法:1.采用细胞病变法(CPE)测试药物(黄芩苷、连翘苷)对Hela细胞的最大无毒浓度,确定各种药物的实验浓度;2.甲型流感病毒NP真核表达载体pc DNA3.1(+)/NP运用脂质体法转染Hela细胞,作为实验用靶细胞,反转录-实时荧光定量PCR(RT-q PCR)确定成功转染Hela细胞;3.反转录-实时荧光定量PCR(RT-q PCR)评价黄芩苷联合连翘苷对靶细胞NP基因表达的影响,运用统计学相关软件进行分析;4.反转录-实时荧光定量PCR(RT-q PCR)评价不同浓度黄芩苷、连翘苷对靶细胞NP基因表达的抑制作用,并计算黄芩苷、连翘苷对靶细胞的半数抑制浓度(IC50);5.反转录-实时荧光定量PCR(RT-q PCR)评价IC25、IC50剂量的黄芩苷联合IC25、IC50、IC75剂量的连翘苷对靶细胞NP基因表达的联合作用效果(协同、相加、拮抗)。本实验设Hela细胞组、脂质体组、重组质粒转染组(转染pc DNA3.1(+)/NP)、黄芩苷组、连翘苷组、黄芩苷联合连翘苷组。结果:1.细胞病变法得出各种药物的最大无毒浓度分别为:黄芩苷:31.25μg·ml-1,连翘苷:25μg·ml-1;实验浓度:黄芩苷:15.625μg·ml-1,连翘苷:12.5μg·ml-1;且黄芩苷(15.625μg·ml-1)联合连翘苷(12.5μg·ml-1)显示无毒。2.重组质粒转染组NP基因表达量明显高于Hela细胞组,差异具有显著统计学意义(t=7.742,P<0.01);重组质粒转染组NP基因表达量明显高于脂质体组,差异具有显著统计学意义(t=7.802,P<0.01);说明流感病毒真核表达载体pc DNA3.1(+)/NP成功转染Hela细胞。3.黄芩苷(15.625μg·ml-1)联合连翘苷(12.5μg·ml-1)组NP基因表达量明显低于重组质粒转染组,差异具有显著统计学意义(t=6.966,P<0.01)。4.在一定浓度范围内,黄芩苷、连翘苷对靶细胞NP基因表达有明显的抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性;黄芩苷、连翘苷对靶细胞NP基因表达的IC50分别为:10.4627μg·ml-1,4.16832μg·ml-1。5.低浓度、中浓度黄芩苷(IC25、IC50)联合低浓度、中浓度、高连翘苷(IC25、IC50、IC75)对靶细胞NP基因表达的抑制作用CI值分别为:IC25黄芩苷+IC25连翘苷:1.24169;IC25黄芩苷+IC50连翘苷:0.95414;IC25黄芩苷+IC75连翘苷:0.94745;IC50黄芩苷+IC25连翘苷:0.89460;IC50黄芩苷+IC50连翘苷:0.85482;IC50黄芩苷+IC75连翘苷:0.89201。低浓度黄芩苷联合低浓度连翘苷起拮抗作用CI>1;余浓度联合起协同作用CI<1。结论:黄芩苷联合连翘苷能够下调转染Hela细胞的甲型流感病毒NP基因表达量,并且在一定浓度范围内显示出协同作用。