论文部分内容阅读
目的：探讨当归提取物中各组分的协同抗炎、抗氧化作用,探究各组分的配伍比例对其相互作用的影响,为中药当归的提取及组分配伍应用提供实验依据。方法：按照课题组已建提取工艺提取当归超临界提取物、当归多糖及当归酚酸,优化大孔吸附树脂富集当归总酚酸的工艺；采用LPS诱导的RAW264.7细胞模型探讨当归提取物之间以及当归中主要单体成分之间的协同抗炎作用；采用DPPH清除自由基实验及考察当归提取物之间的协同抗氧化作用,采用AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌模型考察当归多糖与当归超临界提取配伍应用是否能够增强当归超临界提取物防治小鼠结直肠癌的作用。利用Isobologram分析法及相互作用指数进行分析,判断当归各组分协同作用的配伍比例。结果：采用优选的当归酚酸提取分离工艺：70%乙醇提取液浓缩至0.5g生药.mL-1,5000r.min-1,离心30min,取中间清液,上NKA-9大孔吸附树脂,上样量为9倍量柱体积,吸附流速为0.5mL.min-1,径高比为：1：8,3BV蒸馏水、3BV10%乙醇除杂,除杂流速为1mL.min-1,8BV的45%乙醇进行洗脱,洗脱流速为：3mL.min-‘,稳定可行。当归油中主要成分藁本内酯与丁烯基苯酞在配伍比例为1：10、1：20时,能够显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞模型NO产生,两比例下的各浓度混合物相互作用指数τ均小于1,表现为协同抗炎作用；在配伍比例为1：10,τ平均值较1：20时小,故该比例下协同抗炎作用最强。当归油中的主要成分藁本内酯与当归总酚酸中的主要成分阿魏酸在配伍比例为1：10、1：20、1：30的配伍比例下均能够显著抑制,表现为协同抗炎作用,其中在配伍比例为1：30,T平均值较1：20时小,故该比例下协同抗炎作用最强。当归总油与当归总酚酸在配伍比例为原药材中的比例1：2时,其τ值最小,协同作用最强。当归总油与当归多糖或当归总酚酸配伍应用能够协同清除DPPH自由基,只要在混合药物高剂量条件下才表现出协同抗氧化作用。当归多糖与当归总油配伍应用作用于AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌模型,其肿瘤抑制率低于单用当归多糖或当归总油,二者联合应用具有协同作用；相对于模型对照组,还能降低结肠部位PCNA,COX-2及iNOS的表达。结论：当归提取物各组分中各单体成分具有一定的配伍配比关系,当归提取物各组分之间也具有一定的配伍配比关系。在特定的比例条件下,各组分或单体配伍可以产生协同增效的作用,为中药尤其是当归的多层次配伍应用及提取分离提供了一定研究依据。