Adp是一个进化上保守的抗肥胖基因,在果蝇、哺乳动物和人类中有很高的同源性。Adp以剂量依赖的方式抑制脂肪的积累,抑制Adp的表达会促进蠕虫和果蝇体内脂肪的积累。Adp基因型杂合的果蝇和老鼠都表现出肥胖的表型,但是Adp基因型杂合个体的体内脂肪含量低于Adp双突变体。Adp在很多组织都有表达,在脂肪组织中过量表达Adp会引起消瘦的表型,但是目前也还不清楚这个基因在其他组织中的作用。当Adp不能与DDB1结合时,它就不能通过CRLs泛素化系统发挥其抑制脂肪细胞分化的功能。Adp在细胞核和细胞质中都有表达,但是只有细胞核中的Adp能够发挥抑制脂肪积累的功能。脂肪细胞分化是一系列脂肪细胞分化特异性的基因有序表达的生物学过程。这个过程需要多种信号通路的协同作用,并形成了一个精密的转录调控网络。C/EBPα和PPARy是这一过程的核心调节子。在脂肪细胞分化早期,C/EBPβ、C/EBPδ、KLFs、CREB、Krox20、SREBP-1c等早期转录因子分别从不同的通路被诱导激活,并随后激活后期转录因子的表达,最终梭形的脂肪前体细胞转变为圆形、含有丰富脂滴的成熟脂肪细胞。本论文首先通过原核表达系统得到Adp重组蛋白,并制备得到Adp的多克隆抗体。接着又通过3T3-L1脂肪前体细胞模型研究了 Adp抑制脂肪细胞分化的分子机制。Adp可能作为DDB1-CUL4-ROC1(CRL4)泛素化系统的adaptor,通过CRL4Adp E3 ligase泛素化降解脂肪细胞分化过程中的关键转录因子或者共激活因子,从而抑制脂肪细胞的分化。在对脂肪细胞分化相关的转录因子进行初筛后,并没有发现CRL4AdpE3 ligase的泛素化底物。通过RT-qPCR实验发现,Adp是通过影响脂肪细胞分化的后期事件来发挥其抗肥胖的功能。而脂肪细胞分化后期转录因子是被前期转录因子及其共转录因子所调控。C/EBPβ作为脂肪细胞分化前期最重要的转录因子,很有可能是它的辅激活因子被泛素化调控,并进而影响到后期转录因子的表达。所以我们通过C/EBPβ pull down实验来寻找与其相互作用的辅激活因子,并从中筛选CRL4Adp E3 ligase的泛素化底物。通过Candidate screening策略筛选及进一步的蛋白降解实验,最终发现了共激活因子—Protein C,能够被CRL4AdpE3 ligase泛素化系统所降解。这些结果为临床上治疗肥胖症提供了潜在的治疗靶点。