二氧化硫吸入对哮喘大鼠迟发相反应的影响

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目的:探讨吸入不同浓度二氧化硫对哮喘大鼠迟发相反应的影响。方法:选择Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,每组各10只。B组为哮喘模型组,利用新鲜配置卵清白蛋白(OVA)100mg+氢氧化铝100mg共1ml于第1、8、15天给予腹腔注射,第22天开始给予3%卵清白蛋白(OVA)+生理盐水溶液雾化吸入,每天一次,每次30分钟,连续7天。A组为正常对照组,以生理盐水代替卵清白蛋白分别进行腹腔注射和雾化吸入。观察组分C、D组,各组分别给予OVA进行攻击,步骤同B组。C,D组于哮喘模型结束后分别吸入低浓度(15mg/m3)、高浓度(30mg/m3)二氧化硫,染毒时在玻璃熏气箱中进行动式染毒,每日4小时,连续2周。整个实验过程控制温度和湿度变化在±10%以内,箱内二氧化硫浓度通过恒温恒流大气采样器采集、盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定。同时A、B组也在同样大小的玻璃箱中接受新鲜空气,每日4小时,连续2周。二氧化硫吸入结束一周后给予3%OVA+生理盐水雾化吸入30分钟,经过24小时后,各组再用乙酰甲胆碱进行支气管激发试验。每组测量气道阻力的变化,观察是否产生气道高反应性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中白介素-13(IL-13)和免疫球蛋白E(IgE)的浓度;采用免疫组化学方法测定肺组织中NF-κB及TNF-α阳性表达;观察肺组织病理学变化。结果:①A组大鼠未发生气道高反应性,B、C、D组在行支气管激发试验后气道阻力(RL)比值比正常对照组增高,比较差异有统计学意义(F=160.541,P<0.01),C、D组气道阻力比值高于B组,比较差异有统计学意义(P<0.01)。D组气道阻力比值高于C组,比较差异有统计学意义(P<0.01)。②B、C、D组大鼠血清IL-13的浓度较A组明显增高,与A组比较差异均有统计学意义(F=25.707,P<0.01),C组大鼠血清中IL-13的浓度与B组比较差异无统计学意义(P>0.05),D组大鼠血清中IL-13的浓度与C组比较有统计学意义(P<0.05)。③B、C、D组大鼠血清中IgE的浓度较A组明显增高,与A组比较差异均有统计学意义(F=28.715,P<0.01),C、D组大鼠血清中IgE的浓度与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。④A组胞浆中可见弱的NF-κB表达,B组及C、D组大鼠NF-κB在肺组织细胞浆内见不同程度的阳性表达,与A组比较有统计学意义(F=367.422,P<0.01);随着吸入S02浓度升高,阳性表达逐渐增强(P<0.01)。⑤A组几乎无阳性TNF-a表达;B组及C、D组肺组织细胞浆内见不同程度的阳性表达,与A组比较有统计学意义(F=301.286,P<0.01);随着吸入S02浓度升高,阳性表达逐渐增强(P<0.01)⑥肺组织病理切片中可以看到A组上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞的浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化。B、C、D组出现支气管粘膜上皮细胞有不同程度坏死、中断、脱落,杯状细胞增生,气道周围的炎症细胞浸润及基底膜纤维化等改变。B、C、D组杯状细胞百分比较A组均明显增高,比较差异有统计学意义(F=79.798,P<0.01),C、D组与B组比较差异有统计学意义(P<0.01),D组与C组比较,比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论:二氧化硫吸入可以加重哮喘大鼠迟发相反应。
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