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目的:探讨γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)在胫骨癌痛大鼠脊髓背根神经节的表达及其在疼痛中的作用。 方法:采用大鼠胫骨癌痛模型。选择雌性SD大鼠,体重160g-200g。实验一60只大鼠随机分成六组,每组10只,S组(假手术组):右侧胫骨上段骨髓腔注入5μl生理盐水。N组(空白对照组):不作任何处理M组(模型组):右侧胫骨上段骨髓腔注入5μl Walker-256大鼠乳腺癌细胞(1×105/μl)。(又分为M5d组,7d组,14d组,21d组)分别在术前1天、术后第1、3、5、7、10、14、21天测定大鼠机械痛敏、热痛敏和自由行走痛行为学评分,术后第5、7、14、21天取出大鼠腰段脊髓背根神经节,采用Western blot方法对大鼠背根神经节,分别在各自时间点灌注取材L4-5背根神经节。用免疫组织化学方法观察GAT-1的表达。实验二40只大鼠随机分成5组(n=8):假手术组+NS(S组)、骨癌痛+NS(N1组)、骨癌痛+NO-71110μg(N2组)、骨癌痛+NO-71120μg(N3组)、骨癌痛+NO-71140μg(N4组),于手术前两天和手术当天,鞘内分别给予生理盐水(S组、N1组)、NO一71110μg(N2组)、NO-71120μg(N3组)、NO-71140μg(N4组)每天给药一次,术前1天,术后第3、5、7、10、14、21天观察大鼠机械缩足反射阈值和行走痛行为学分。 结果:实验一(1)疼痛行为学:S组大鼠机械缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期和行走痛行为学评分在术后各时间点组内相比差异无显著性;M组大鼠MWT、行走痛行为学评分于术后第五天开始与手术前相比差异有显著性(P<0.05);与S组相比,从术后第七天开始,M组MWT显著降低(P<0.05),行走痛行为学评分显著升高(P<0.05);M组大鼠热缩足反射潜伏期在术后各时间点组内相比差异无显著性。(2)Westernblot:与假手术组相比,术后第7天(P<0.05)、14天(P<0.05)、21天(P<0.01)癌痛大鼠背根神经节GAT-1表达上调。(3)免疫组织化学法:胫骨癌痛组(5d组,7d组,和14d组)背根神经节GAT-1的免疫阳性神经元数和染色深度均比假手术组和空白对照组显著增加(P<0.05和P<0.01)。实验二S组大鼠机械缩足反射阈值和行走痛行为学评分在术后各时间点组内相比差异无显著性。与S组相比,N1组大鼠机械缩足反射阈值和行走痛行为学评分于术后第七天开始有显著性差异(P<0.01);与S组相比,N2、N3、N4组大鼠机械缩足反射阈值和行走痛行为学评分于术后第7天无差异(P>0.05),于术后第10天差异有显著性(P<0.01)。 结论:1.胫骨癌痛大鼠脊髓背角GAT-1表达明显上调,GAT-1可能参与了骨癌痛的形成机制。2.鞘内给予GAT-1选择性抑制剂NO-711可以延迟胫骨癌痛大鼠痛觉过敏的产生,减轻已形成的痛觉过敏。