黔产罗汉果抗炎抑菌谱效关系研究

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目的:建立罗汉果抗炎抑菌谱效关系模型,分析罗汉果不同极性提取物的药效成分差。方法:(1)通过建立脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW 264.7细胞炎症模型,以NO、IL-6、TNF-α3个炎性因子释放量为指标,研究罗汉果不同极性提取物的体外抗炎活性。(2)利用二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型,研究罗汉果不同极性提取物对体内抗炎活性的影响;(3)采用滤纸片法,以细菌的抑菌圈大小为依据,研究罗汉果不同极性提取物的抑菌活性。(4)通过高效液相色谱法,考察罗汉果不同极性提取物的色谱条件,建立罗汉果不同极性提取物的指纹图谱,确定罗汉果不同极性指纹图谱共有峰;(5)基于灰色关联度和偏最小二乘回归分析法,建立罗汉果抗炎抑菌谱效关系模型。结果:(1)体外抗炎活性结果表明5个极性提取物在不影响细胞存活率下,均能抑制NO、IL-6、TNF-α的释放,且抑制作用呈浓度依赖性,乙酸乙酯提取物较其他4个极性提取物抑制作用强。(2)体内抗炎活性研究发现罗汉果5个极性提取物对小鼠耳肿胀均具有抑制作用,且具有剂量依赖性。(3)抑菌结果表明罗汉果5个极性均具有不同程度的抑菌效果,其中对大肠杆菌抑制作用最为显著;对于粪肠球菌,罗汉果提取物中只有水、甲醇、乙醇和正丁醇提取物对其具有抑制作用;对于铜绿假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌和变形杆菌有3个极性提取物有抑菌活性,而对于枯草芽孢杆菌,抑菌效果最差,只有正丁醇和乙酸乙酯提取物对其有抑菌活性。(4)建立了罗汉果5个极性提取物指纹图谱,确定了9个共有峰,并成功指认8、9号峰,分别为11-O罗汉果皂苷V和罗汉果皂苷V;(5)灰色关联度和偏最小二乘法分析结果表明,罗汉果不同极性提取物是通过复合成分来达到抗炎抑菌药效活性的,并初步确认了罗汉果抗炎抑菌活性主要药效贡献峰。结论:基于罗汉果不同极性提取物的HPLC指纹图谱数据,结合抑菌实验及体内外抗炎活性的研究,并采用灰色关联度和偏最小二乘回归分析法,初步确定罗汉果抗炎抑菌活性的谱效关系。本研究有效地分析了罗汉果抗炎抑菌活性药效成分,在一定程度上揭示了罗汉果抗炎抑菌活性药效物质基础,为罗汉果质量控制和抗炎抑菌活性的研究提供参考依据。
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