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本实验对人宫颈癌细胞(Hela细胞)进行体外培养,通过分别在培养基中添加7种刺激液:雌二醇(1nM)、三氧化二砷(0.5μM、lμM、5μM)、雌二酵拮抗剂(500nM)、雌二醇(1nM)与雌二醇拮抗剂(500nM)、三氧化二砷(1μM)与雌二醇拮抗剂(500nM),观察Hela细胞体外生长状况及检测雌激素受体(ER)与孕激素受体(PR)的表达,来研究三氧化二砷的雌激素效应。
本实验采用酶消化法对Hela细胞进行体外生长培养。采用酶联仪测定琥珀酸脱氢酶活性的方法(MTT比色法),测定Hela细胞生长状况。采用流式细胞计量术测定细胞中DNA含量,反应细胞周期的变化。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)对目的条带进行扩增,测定雌激素受体及孕激素受体的表达。
结果表明,0.5μM三氧化二砷与1nM雌二醇的作用效果相似。它们都促进细胞增殖,促使细胞进入DNA合成期(S期),减少雌激素受体的表达,提高孕激素受体的表达。其它各组对Hela细胞的生长均呈现抑制作用,并且雌激素受体与孕激素受体的表达发生相应的变化。从各项结果显示的数据看,微量的三氧化二砷(<0.5μM)具有雌激素样效应,且可被雌二醇拮抗剂所拮抗。这为探明三氧化二砷诱发癌症及治疗癌症的机理提供了帮助。