醋制延胡索对其入肝经作用的影响研究

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延胡索为临床常用止痛中药,醋制可引药入肝,增强其行气止痛功效,2010版《中国药典》共收载44种以醋制品入药的成方制剂。本文通过醋制前后延胡索药效变化、眼组织中微量元素变化,化学成分整体变化和延胡索乙素含量变化以及药代初步研究,阐释醋制对延胡索增强入肝经的作用机理。以小鼠耳缘肿胀实验验证延胡索的抗炎作用,选择耳肿胀度和肿胀抑制率为抗炎指标,探索对比研究醋制前后抗炎、止痛作用,明确炮制前后延胡索的主要药效变化。结果提示:生品高低剂量组、醋品高低剂量组耳肿胀度较生理盐水组降低;醋品高低剂量组较生品高低剂量组肿胀抑制率升高。以热传导作为致痛因素,选择扭体次数和镇痛率直观比较醋制对延胡索止痛功效的影响。提示:阳性、生品高低剂量、醋品高低剂量组平均扭体数较生理盐水组均有所降低,醋低组平均扭体数较生低组降低,醋高组平均扭体数较生低组降低;醋低组较生低组镇痛率升高,醋高组镇痛率较生高组升高。以醋酸腹腔给药让小鼠产生痛感,比较痛阈值和痛阈提高百分率反映延胡索醋制前后的止痛强弱。结果显示:给药后小鼠的痛阈值明显提高,且醋品低剂量痛阈百分率较生品低剂量痛阈百分率有所提高;醋品高剂量痛阈百分率较生品高剂量痛阈百分率有显著性差异,表明醋品高剂量痛阈百分率较生品高剂量痛阈百分率有所提高。Elisa检测醋制前后给药后的小鼠血清中β-内啡肽、PGE-2含量作为内在止痛指标,再次验证醋制对延胡索止痛作用的影响。结果显示:阳性组、生品高低剂量组、醋品高低剂量组较生理盐水组小鼠的PGE-2、β-内啡肽含量明显降低,说明给药后较生理盐水组耐痛能力显著提高;且醋品低剂量较生品低剂量PGE-2、β内啡肽含量有显著性差异,表明醋品低剂量较生品低剂量PGE-2、β内啡肽含量有所降低;醋品高剂量PGE-2含量较生品高剂量组有显著性差异,表明醋品高剂量PGE-2含量较生品高剂量组有所降低;醋品高剂量组β内啡肽含量均值从数据上低于生品低剂量组,说明醋品高剂量较生品高剂量组止痛能力略强。通过测定小鼠眼组织中微量元素铜、锌、锰的含量变化,为肝开窍于目提供依据。眼部功能与多种微量元素关系密切,尤其是元素铜、锌、锰。用微量元素分析仪测定醋制前后小鼠眼部微量元素铜、锌、锰含量。结果显示:醋制能显著增加小鼠眼底血中Cu,Zn及眼球玻璃体中Zn,Mn含量,醋制延胡索后小鼠眼底血Mn含量,眼球玻璃体Cu含量也均有升高。采用高效液相色谱法先对醋制前后延胡索乙素(THP)含量的变化进行对比研究,分析延胡索醋制前后整体成分的变化规律,为THP的体内分析提供依据;经比对所得特征图谱显示:共有21个共有峰;16号峰为延胡索乙素,生品特征图谱中有2号,醋品无此峰,醋品特征图谱中有10号峰,而生品无。延胡索生品图谱中仅18、20、21号峰峰面积高于醋品;1-16号峰,17号醋品峰面积均高于生品。采用现代药物代谢的研究方法,以具有止痛的药效主要生物碱THP作为目标化合物,以高效液相色谱法测定血液、脏器中延胡索乙素在动物体内的代谢和分布。结果显示:血清中THP比较:醋品组含量高于生品组,醋品加延胡索乙素组含量高于生品加延胡索乙素组;对脏器心、肝、脾、肺、肾样品进行分析,除肝脏外其他脏器都未发现THP,且对4组样品进行分析,醋品组含量高于生品组,醋品加THP组含量高于生品加THP组。综上,生醋品水提物具有明显的抗炎作用,醋品的抗炎作用较生品强;生醋品水提物具有明显的止痛功效,醋品止痛作用较生品强;醋制后小鼠眼底血和眼球玻璃体中Cu、Zn、Mn含量增加;延胡索醋制前后特征图谱进行对比,醋品无2号峰,生品无10号峰,生品图谱中18、20、21号峰面积高于醋品,1~16号及17号峰峰面积高于生品;醋品水提物血清、肝脏中THP含量高于生品,醋制能促进THP在肝脏和血清的富集。
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