目的 硒、锌等微量元素在中枢神经系统含量丰富,对维持中枢神经系统的正常生理功能起到了重要的作用。本文通过体内实验和体外实验,探究硒、锌对淀粉样前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)酶解通路的作用和机制。方法 体外实验:用0.1μmol/L的硒、锌处理胚鼠皮层神经元细胞,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测γ-内切酶活性;另用脂质体转染构建APP695高表达CHO细胞系,用G418(500mg/L)对转染后细胞进行筛选鉴定,最终获得表达人CHO-APP695细胞模型,并经过Western鉴定,最终确定转染成功。用0.1μmol/L的硒、锌处理转染细胞,48h后,ELISA法检测细胞培养上清中Aβ1-40含量,Western-blot法检测细胞裂解液APP-N端片段蛋白的表达。体内实验:选用健康雄性两月龄昆明种小鼠60只,随机分为6组,每组10只,每只小鼠按0.1mL/10g的容积给药。连续60d腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg bw),建立老年性痴呆模型,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中α、β、γ-分泌酶含量以及脑组织中Aβ1-40含量测定;Western-blot法检测脑组织中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化Tau(Ph-tau)蛋白水平。结果 体外实验结果:与对照组比较,硒、锌处理组抑制内源性Y-内切酶的活性,且硒、锌联合使用,抑制作用增强;Aβ1-0的含量也减少;单纯硒、锌和硒锌联合处理组,APP-N端片段蛋白表达水平增加。体内实验结果:ELISA法显示,与模型组比较,硒、锌可以增强α-分泌酶活性,抑制β、Y-分泌酶的活性,且硒锌联合作用增强,脑组织中Aβ1-40含量明显降低。Western-blot法检测显示,与对照组比较,AD模型组GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平升高,而硒、锌处理组和硒锌联合作用组,GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平明显降低。结论:硒、锌通过增加内源性α-分泌酶的活性,抑制β、γ-分泌酶的活性,减少Aβ1-40的生成,降低GSK-3β、Ph-tau蛋白表达水平,可能对阿尔茨海默病的发病及进展有一定的预防保护作用;硒、锌联合用药比单独使用效果更好。