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核受体Nur77是由立早基因NR4A1编码的孤儿受体,在肿瘤中发挥着相当复杂和广泛的生物学功能,参与肿瘤的增殖,凋亡,代谢,转移以及血管生成等病理过程,被看作是一个良好的药物作用靶标。分化抑制因子-1(Inhibitorof differentiation 1,ID1)的蛋白降解机制紊乱与肿瘤发生发展的演进过程密切相关。如果能有效的调控ID1在肿瘤中的蛋白表达,对于众多疾病的治疗具有十分重要的意义。在本文中,我们报道了核受体Nur77在结肠癌细胞中可以不依赖转录功能调控分化抑制因子-1的泛素化途径降解。我们研究发现,在结肠癌细胞系中过表达Nur77蛋白会降低ID1的表达,而敲低Nur77会上调ID1的表达,因此Nur77和ID1的表达呈负相关。qRT-PCR实验结果显示ID1的mRNA水平并没有随着Nur77表达量的多少发生明显变化,这揭示Nur77在转录后水平调节ID1蛋白的表达量。Smurf2蛋白是参与ID1泛素化降解的E3连接酶。通过过表达和敲低Smurf2和Nur77,我们发现Nur77和Smurf2都可以明显缩短ID1的降解半衰期,降低其蛋白稳定性。我们在结肠癌细胞HCT116中应用蛋白酶抑制剂MG132,PI3K/AKT通路抑制剂Wortmannin以及自噬抑制剂Chloroquine和Bafilomycin进行研究,发现只有蛋白酶抑制剂MG132可以逆转Nur77介导的ID1蛋白降解。这说明Nur77通过蛋白酶体途径诱导ID1的降解。通过免疫共沉淀实验发现,在结肠癌细胞中Nur77可以与ID1结合,从而增强ID1与Smurf2的相互作用。进一步研究发现,当敲低结肠癌细胞SW620中的Nur77蛋白后,ID1的泛素化修饰显著降低。这表明Nur77通过促进Smurf2和ID1的结合,诱导ID1的泛素化降解。雷公藤红素是一个活性突出,作用广泛的传统天然产物,可以调控多种细胞信号途径治疗炎症和肿瘤等疾病。前面我们实验室报道了 Nur77可以和雷公藤红素较好的结合从而发挥其抗炎功能,而在这里我们研究结果表明雷公藤红素可以诱导ID1降解,且其诱导ID1降解是Nur77依赖的。进一步的研究发现雷公藤红素能够促进ID1的泛素化,这揭示雷公藤红素以泛素依赖的途径诱导ID降解。总之,本论文揭示了核受体Nur77参与调节ID1蛋白的稳定性并且揭示了其中的作用机制。同时还发现天然产物雷公藤红素依赖Nur77诱导ID1蛋白的泛素化降解,揭示了 Nur77作为潜在药物作用靶点治疗结肠癌的可能性。