TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中的动态变化及柴朴汤的干预研究

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目的:探讨TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中的动态变化,及其在哮喘发病中的作用,研究柴朴汤治疗支气管哮喘的可能作用机制。方法:健康雄性SD大鼠70只随机分成A组10只,B组60只分为(哮喘二周B1组10只、哮喘四周B2组10只、哮喘八周B3组10只、柴朴汤二周B4组10只、柴朴汤四周B5组10只、柴朴汤八周B6组10只)。以卵蛋白雾化复制哮喘模型,在激发哮喘二周、四周及八周后处死,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测气道TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平,用免疫组织化学染色法检测气道TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4、Smad7的蛋白表达,同时用图象分析法测量大鼠气道形态学参数。结果:1.哮喘大鼠气道重塑的改变:哮喘大鼠随激发时间的延长,气道重塑越明显。哮喘大鼠激发后二周支气管壁周围可见大量炎症细胞浸润,气道平滑肌增厚,杯状细胞增生,伴黏液高分泌,胶原过度沉积,基底膜增厚;哮喘四周组与二周组相比,气道平滑肌明显增厚,气道壁更厚,差异有显著性( P < 0.05);哮喘八周组与四周组相比,气道平滑肌明显增厚,管腔更狭窄,差异有显著性( P < 0.05)。2.哮喘大鼠气道TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4、Smad7的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平:哮喘大鼠激发后二周气道TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平升高,而Smad7的蛋白表达下降,四周后TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平进一步升高,而Smad7的蛋白表达进一步下降,与二周组相比,统计学处理差异有显著性( P < 0.05);八周后TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平更加升高,而Smad7的蛋白表达显著下降,与四周组相比,统计学处理差异有显著性( P < 0.05);柴朴汤二周组大鼠TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平相比哮喘二周组有明显的下降,统计学处理差异有显著性( P < 0.05);但相比对照组则升高,统计学处理差异没有显著性( P > 0.05);柴朴汤四周组大鼠TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平相比哮喘四周组有明显的下降,但相比对照组则升高,统计学处理差异有显著性( P < 0.05);柴朴汤八周组大鼠TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平相比哮喘八周组有明显的下降,但相比对照组则升高,统计学处理差异有显著性( P < 0.05);而Smad7的蛋白表达相比哮喘组有明显的升高,但相比对照组则下降,统计学处理差异有显著性( P < 0.05)。结论:1.哮喘大鼠气道重塑随着激发时间的延长,α-SMA的表达逐渐增加,其气道平滑肌逐渐增厚。2. TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中呈现动态变化过程,其中TGF-β1、Smad3、Smad4促进气道重塑,而Smad7抑制气道重塑。3.柴朴汤能抑制哮喘大鼠气道重塑,机制可能与TGF-β1/Smads通路有关。
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