论文部分内容阅读
目的:通过正交实验优选出二色补血草总黄酮的最佳提取工艺,建立大孔吸附树脂分离纯化二色补血草总黄酮的实验方法,并建立总黄酮的含量测定方法。初步确定了二色补血草总黄酮标准提取物质量标准。最后对二色补血草总黄酮和二色补血草水煎剂进行了出凝血实验和对性激素影响实验的比较。
方法:以芦丁为对照品,采用铝盐络合比色法,用UV-1100分光光度计确定二色补血草总黄酮含量测定方法。采用L9(43)正交实验设计,以总黄酮含量为指标,考察乙醇用量,回流时间,回流次数,乙醇浓度四个因素对二色补血草总黄酮提取率的影响,确定最佳提取工艺。考察D-101大孔吸附树脂对二色补血草总黄酮的吸附和洗脱条件,确定了总黄酮的分离纯化工艺。初步建立了二色补血草总黄酮标准提取物的质量标准。采用水煎剂大中小剂量,总黄酮大中小剂量和生理盐水共7组对比了对小鼠出凝血时间的影响,将去势雌性大鼠分成阴性对照组(生理盐水),阳性对照组(宫血宁),总黄酮组,水煎液大,中,小剂量组,以促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的变化为指标,考察了总黄酮和水煎液对促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的影响。
结果:应用比色法建立了二色补血草总黄酮含量测定的实验条件,得到回归直线方程为y=1.366680x-0.009568,r=0.9999。y为吸光度,x为芦丁浓度(mg/ml)。线性范围为:0.1025mg/ml~0.6150mg/ml。总黄酮最佳提取工艺为料液比为1:10,浓度为60%的乙醇为提取剂,回流提取3次,每次40min。D-101大孔吸附树脂的吸附和洗脱条件为:1g树脂的吸附容量为42.27mg,水洗至无色后,以5倍体积60%乙醇以1.5mi/min的流速洗脱。水煎液和总黄酮的药理学实验表明,总黄酮对小鼠出血时间有影响,对凝血时间无影响。总黄酮对大鼠性激素无影响。