目的:研究碳青霉烯类抗菌药物耐药的鲍曼不动杆菌(CRAB)编码碳青霉烯酶的主要耐药基因类型，包括编码丝氨酸蛋白酶（A类酶）、苯唑西林水解酶（D类酶）以及金属酶（B类酶）的基因类型。明确本地区CRAB的临床分布特征及耐药的分子机制，为治疗和控制CRAB感染提供理论参考依据。　　研究方法:1、研究对象:中国医科大学附属第一医院检验科2011年1月至2015年12月无菌体液标本分离培养获得的57株CRAB菌株。　　2、主要试剂及仪器:VITEK-2全自动微生物分析系统及鉴定卡;法国梅里埃生物公司的抗菌药物药敏卡;日本TakaRa公司的DNA提取试剂盒;美国ABI公司的9700型PCR扩增仪;美国Alpha Innotech有限公司的紫外凝胶成像仪;BIO-RAD电泳仪。PCR所有引物均由上海生工生物技术有限公司合成。　　3、菌株鉴定和药敏试验:采用VITEK-2全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏分析，并通过Whonet5.6分析软件对结果进行分析处理。药敏结果依据美国临床实验室标准化研究所(CLSI) M100-22标准进行判定。　　4、核酸DNA提取:将菌株接种到血平板37℃培养箱中过夜培养，应用TakaRaminiBEST Bacterial Genomic Extraction DNA试剂盒提取57株CRAB菌株DNA各200μL。　　5、耐药基因检测:采用聚合酶链反应(PCR)检测CRAB中编码碳青霉烯酶的耐药基因包括A类酶:blaPER-1;B类酶:blaVIM和blaIMP;D类酶:blaOXA-51，blaOXA-23，blaOXA-24，blaOXA-58。扩增产物经1.5％的琼脂糖凝胶电泳分析，电泳结束后在紫外凝胶成像仪下观察目的基因条带，并拍照成像。　　6、基因测序: PCR产物送上海生工生物技术公司，经纯化后应用DNA测序仪进行基因序列测定。测序结果与网上基因库已知的碳青霉烯酶基因型序列作blast比对（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast），一致程度达到98％以上的基因序列则可判断为相同基因型。　　结果:1、CRAB菌株的来源及科室分布:CRAB菌株主要存在于血液(58％)，其它依次为脑脊液(21％)，引流液(10.5％)、脓汁(8.8％)及分泌物(1.7％)。CRAB菌株的科室分布以外科ICU的检出率最高(59.6％)，其次为神经外科(19.3％)。2、CRAB药敏结果:57株CRAB中除碳青霉烯类抗菌药物全部耐药外，对其它β-内酰胺类药物和四环素耐药率达90％以上，对氨基糖甙类和喹诺酮类的耐药率均超过60％。3、57株CRAB碳青霉烯酶基因型:CRAB携带D类酶blaOXA-51的检出率为100％，blaOXA-23的检出率为96.5％;blaOXA-24的检出率为12.3％，其中3.5％的CRAB菌株单独携带blaOXA-24耐药基因，8.8％的CRAB同时携带blaOXA-24与blaOXA-23耐药基因;未发现携带blaOXA-58基因的CRAB菌株;A类酶基因型:blaPER-1的检出率为5.3％，全部与blaOXA-23以联合耐药的形式存在;未发现B类酶中携带blaVIM或blaIMP基因的菌株。　　结论:1、本地区CRAB碳青霉烯酶基因型主要为baOXA-23，它可以与同类碳青霉烯酶blaOXA-24或不同类型的碳青霉烯酶blaPER-1之间出现联合耐药。2、部分CRAB菌株携带blaOXA-24基因，尚未出现广泛流行。3、未发现携带blaOXA-58基因的CRAB菌株。4、未发现携带金属酶基因的CRAB菌株。