【摘 要】
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植物MicroRNA(miRNA)是一类内源性的非编码小分子RNA,它们参与调节植物生长、发育和代谢过程中多种基因的表达。近期的研究发现miRNA参与调节磷的吸收和利用,影响了植物对低
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植物MicroRNA(miRNA)是一类内源性的非编码小分子RNA,它们参与调节植物生长、发育和代谢过程中多种基因的表达。近期的研究发现miRNA参与调节磷的吸收和利用,影响了植物对低磷胁迫的适应能力。在我们的前期研究中,通过高用量测序分析发现,miR0078-3p在低磷胁迫小麦(CS)地下部分里差异表达。本研究克隆小麦miR0078-3p前体(pre-MIR0078-3p),构建过表达水稻植株,并且研究其功能。主要研究结果如下:1.根据小麦基因组序列,PCR克隆得到包含有Tae-miR0078-3p前体结构的序列。2.成功构建了植物表达载体pOx-pre-miR0078-3p,抗生素标记为潮霉素。3.利用农杆菌介导的水稻遗传转化获得抗潮霉素(Hyg)的水稻植株。4.对得到的抗性植株进行PCR分子鉴定,获得8株mi R0078-3p阳性水稻。q RT-PCR检测成熟体miR0078-3p在转基因水稻中的表达量与野生型相比,PCR阳性植株MIR0078-3p表达量显著增高。5.对miR0078-3p过表达植株和野生型水稻的靶基因OsILR1进行了表达分析。结果表明,miR0078-3p基因过表达水稻的OsILR1表达量显著低于野生型。6.对转MIR0078-3p基因的水稻表型及其生理数据进行验证。结果表明,该基因过表达植株相比野生型对低磷胁迫有更高的抗性,并引起了许多其它形态和抗性基因表达量的变化。
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