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C5是补体系统中一种组分,在机体免疫防御、维持机体稳定中起重要作用。因此,本研究以C5基因作为奶牛乳房炎的候选基因,选取605头中国荷斯坦奶牛为研究对象,采用巢式PCR、DNA测序、创造酶切位点法PCR及SSCP方法进行SNP的筛选,发现在中国荷斯坦牛C5基因第30内含子、34内含子、41外显子存在单核苷酸多态性(SNPs),分别为T73830G、C81733G和T92133A,均为首次报道的位点。研究发现,三个突变位点突变等位基因的频率分别为0.80,0.28,0.25;PIC值分别为0.27、0.32、0.32,且均为中度多态,遗传变异较大。此外,经X2适合性检验,这三个位点均未达到Hardy-Weinberg平衡状态。
分析605头荷斯坦奶牛C5基因T73830G、C81733G和T92133A三个位点的多态性与305d产奶量、乳蛋白率、乳脂率与SCS这四个产奶性状,结果发现T73830G和T92133A两个位点在305 d产奶量、乳蛋白率、乳脂率有显著影响,对SCS无显著影响。对C5基因3个多态位点T73830G、C81733G和T92133A进行了单倍型组合分析,共构建出8种单倍型,只出现21种单倍型组合。结果显示H4H1单倍型组合个体乳脂率最高;单倍型组合H2H6个体在乳蛋白率上最高,单倍型组合H4H6个体的305天产奶量最高,单倍型组合H4H1个体的体细胞评分最低,为抗乳腺炎最强的单倍型组合。
此外,本试验还随机选取301头荷斯坦奶牛研究牛群中C5基因的三个SNP位点及单倍型组合与ACH50和CH50值之间的关系。研究结果表明,三个位点与ACH50和CH50值均没有显著差异,但单倍型组合H1H5个体的ACH50的水平最高,各单倍型组合个体与CH50之间没有显著差异。