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背景:重症急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis,SAP)病情进展快、死亡率高、并发症多,发病机制复杂,给全球带来很大的经济负担,发病机制主要包括胰酶自身消化学说、胰腺腺泡钙超载学说、胰腺循环障碍学说、炎症因子学说、肠道细菌移位学说、氧化应激学说、细胞凋亡学说等,其中炎症因子学说是发病关键,多种炎症介质共同作用产生炎症的级联放大效应,进而诱发全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response,SIRS)引发多器官功能障碍综合征(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)导致患者死亡。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor Related Apoptosis Inducing Ligand,TRAIL)在细胞或组织中可以与死亡受体(Death Receptor,DR)结合诱导细胞凋亡,TRAIL与DR5结合不仅可以介导细胞凋亡,还可以传导NF-κB通路,生成白细胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α)等炎症因子介导炎性反应。NF-κB是SAP中调节免疫和炎症的关键转录因子,预防或抑制NF-κB的激活已被证明与降低AP的严重程度呈正相关。TRAIL主要有五个死亡受体,其中DR5与TRAIL亲和力最高,自然状态下以可溶性DR5(Soluble DR5)存在,s DR5与TRAIL只能结合不能传递信号可进一步阻断TRAIL介导炎症反应。为了延长s DR5在机体内半衰期及增加疗效,通过基因工程技术将s DR5细胞外结构域和人Ig G1的Fc片段基因融合,获得医用级的s DR5-Fc蛋白。目的:由于缺乏有效的药物治疗,SAP一直是一个治疗难题,如今SAP的治疗仅限于禁食、胃肠减压、抑制胰酶分泌、镇痛、解痉,微循环改善,器官功能保护及其他对症支持疗法,因此,寻找新的和更有效的治疗方案非常重要。本研究通过建立大鼠SAP模型,探讨s DR5-Fc对大鼠重症急性胰腺炎模型是否有治疗作用。方法:25只雄性SD大鼠,6-8周龄,200-220g,,大鼠的皮肤及毛发完整,肢体反应较敏捷。模型建立前1周,在普通清洁级动物房适应性饲养,动物房环境要求:温度为20-25℃、湿度为50±10%、光照/暗循环时间为12小时、通风良好、能够给予足够的饮水和饲料供应、保证每间隔2-3天更换一次垫料,饲料、饮水、饲养笼子及垫料均经过高压灭菌。饲养期间大鼠无疾患及死亡,生存状态良好。随机分为5组:正常组、模型组、Ig G组、低剂量s DR5-Fc组、高剂量s DR5-Fc组,每组5只。对照组(NC组):间隔1小时分2次腹腔注射0.9%生理盐水;模型组(SAP组):间隔一小时分两次腹腔注射10%L-精氨酸(300mg/kg)建立大鼠SAP模型;Ig G组:SAP模型建立成功30min后,经鼠尾静脉给予注射Ig G;低剂量s DR5-Fc组(Dex-L组):SAP模型建立成功30min后,经鼠尾静脉给予注射剂量为7.5mg/kg的s DR5-Fc;高剂量s DR5-Fc组(Dex-H组):SAP模型建立成功30min后,经鼠尾静脉给予注射剂量为15mg/kg的s DR5-Fc。最后一次注射完L-精氨酸溶液后开始计时为造模成功时间,建模后24小时后,大鼠颈动脉取血,一部分全血采用全自动血液细胞分析仪检测白细胞计数(WBC),一部分放入绿色肝素抗凝管后3000rpm,4℃,离心10min,小心吸取上清液,分装在EP管内,分离制作血清,每管血清量>200ul,采用全自动生化分析仪检测C-反应蛋白(CRP)、血清淀粉酶(AMY)、胰淀粉酶(PAMY)、脂肪酶(LIP)、血钙水平。结果:(1)成功建立大鼠重症急性胰腺炎模型;(2)通过动物血液细胞分析仪测定大鼠WBC水平,发现Ig G组和SAP组较NC组明显升高(p<0.05),Ig G组和SAP组WBC水平无明显差异(p>0.05),与SAP组比较,Dex-L组、Dex-H组WBC水平明显下降(p<0.05),Dex-H组下降更加明显(p<0.05);(3)通过全自动生化分析仪测定大鼠AMY、PAMY、LIP、CRP,发现Ig G组和SAP组较NC明显升高(p<0.05),Ig G组和SAP组AMY、PAMY、LIP、CRP水平无明显差异(p>0.05)与SAP组比较,Dex-L组、Dex-H组AMY、PAMY、LIP、CRP水平明显下降(p<0.05),Dex-H组下降更加明显(p<0.05);(4)通过全自动生化分析仪测定大鼠测定大鼠血清钙水平,发现Ig G组和SAP组较NC明显下降(p<0.05),Ig G组和SAP组血钙水平无明显差异(p>0.05),与SAP组比较,Dex-L组、Dex-H组血清钙水平明显升高(p<0.05),Dex-H组升高更加明显(p<0.05)。结论:从WBC、CRP、血清钙、AMY、PAMY、LIP水平来看,s DR5-Fc对大鼠重症急性胰腺炎模型有治疗作用,高剂量组SDR5-Fc治疗作用高于低剂量组。