在我国淡水养殖已有2000多年的历史,淡水养殖在我们的生活中占有很重要的地位。淇河鲫是产于河南省淇河的自然三倍体雌核发育鲫鱼,以生长快、味道美和效益高等优点而久负盛名,具有良好的开发前景。为了提高其生长速度,缩短养殖周期,为市场提供优质产品,促进淇河鲫养殖业的健康持续发展,目前急需研制安全高效的新型鱼用生长促进剂来促进生长和保证食品安全。鱼类生长激素是由脑垂体分泌的多肽类激素,参与鱼类的生长、发育、代谢、食欲和渗透压的调节,广泛应用于鱼类内分泌学、摄食和食物转化效率、生长等的研究。但是由于天然生长激素难以大量获得,限制了其功能和应用研究。另一方面外源生长激素在鱼体内分解消失快,不会在鱼体中积累,这一结果提示,重组生长激素蛋白的应用可能以本原动物来源的为好。本试验进行了淇河鲫生长激素基因cDNA的克隆与序列分析,推导出蛋白质序列并与其他鱼类的生长激素进行了同源性比较和进化系统分析,为从分子水平上了解淇河鲫生长规律打下基础。在真核表达实验中,根据已取得的淇河鲫生长激素的序列全长,在开放性阅读框架两端设计特异引物,用RT-PCR扩增,得到大小为633bp的一个产物,进行测序验证,完全在前测定序列的开放性阅读框架内。将构建好的载体转入大肠杆菌DH5a中进行克隆,用PCR初步筛选出重组子,以EcoRI,SnaBI双酶切做进一步鉴定后,将重组子命名为PPIC9K—GH,并进行序列测定为下一步实验提供重组子。重组质粒经线性化等处理,电击转化导入毕赤酵母GS115中,经MD、G418筛选得到高抗性的阳性菌,抽提酵母基因组进行PCR确定重组载体已经整合到酵母中,并对整合到酵母中的阳性菌进行测序和序列分析。将阳性菌株接种于培养基中,用甲醇进行诱导表达,SDS-Page凝胶电泳,对阳性菌表达的蛋白进行比对分析,在22kDa处有明显条带,说明生长激素在毕赤酵母GS115中获得了分泌表达。